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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术讨论 » 胶体金免疫层析
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会飞的猪tao

新虫 (初入文坛)

[求助] 胶体金免疫层析 已有3人参与

各位大佬，我想问一下就是我最近组装的试纸条，我用的是竞争法，用同一批试纸条做空白对照时侯有的出现假阳，有的T线强于C线，而且这种现象很频繁，不是个别现象，划线的时候划的也很均匀，然后不同T线浓度的试纸条做空白对照的时候也会有假阳出现，用金标抗体试以前组装的试纸条就没有出现过假阳的情况，各位大佬求指点

@dut_ameng @xiejf @nowitzki_ci @神魔流转 @wulishi8 @yswyx 发自小木虫Android客户端
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1楼 2023-08-26 00:03:25
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会飞的猪tao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 159236478 at 2023-08-28 16:32:54
机器划线应该没问题
其他方法配对成功说明抗原抗体结合没问题
出现假阳性应该是：
1.胶体金上面抗体过多或封闭不到位，您已降低抗体含量，可以调整封闭方案
2.样品垫不仅有PEG成份，还有离子强度和pH两因素，提供抗 ...

谢谢大哥。1、我的封闭溶剂是用的10％的BSA，终浓度1%，我之前合成的胶体金是现在胶体金溶液浓度的10倍左右，但是我现在合成金标抗体时加的封闭溶液体积没变，我怀疑可能封闭溶剂过量了，2、如果减少封闭溶液量不行我再换换其他种类的封闭溶剂试试，3、还有我的试纸条在做空白时有时候会出假阳，但是假阳有但没有特别夸张，我还想着重新换一批次的T线抗原试试

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8楼2023-08-30 00:28:48
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159236478

至尊木虫 (知名作家)

游来游去之一级游神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.调整胶体金上面的抗体含量   
2. 调整T线浓度
3.  更换样品垫缓冲配方
仅供参考！

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云山苍苍，江水泱泱，先生之风，山高水长
2楼2023-08-26 08:21:19
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会飞的猪tao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 159236478 at 2023-08-26 08:21:19
1.调整胶体金上面的抗体含量   
2. 调整T线浓度
3.  更换样品垫缓冲配方
仅供参考！

谢谢大哥指点，1.金上抗体量是已经优化好的最少抗体量，离心复溶后没有死金，2.我也试了不同T线浓度做了空白也会偶尔出现假阳，样品垫我买来没有经过任何处理，3.我用现在合成的金标抗体上样到以前组装的试纸条(样品垫没有经过任何处理)，做空白全是正常的
我想可不可能是划线机器的问题，我这种结果很像划线的时候T线抗原分布不均导致的

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3楼2023-08-26 15:08:14
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159236478

至尊木虫 (知名作家)

游来游去之一级游神
就您的问题：
1.T线C线是机器喷的还是手工画？
2.金标垫、样品垫可以处理下，增加缓冲能力
3.您的反应体系其他免疫方法是否配对？

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云山苍苍，江水泱泱，先生之风，山高水长
4楼2023-08-27 08:15:02
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