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zeroron

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[交流] 请问如何对枯草芽孢杆菌破壁

请问一下如何对枯草芽孢杆菌破壁
一般文献中的超声破壁条件都是革兰氏阴性菌大肠杆菌的条件，运用相同条件（200kw或300kw，5s/5s 50min或者300kw， 3s/3s 30min）发现破碎后的菌悬液均不够澄清（当然要比超声之前的澄清一些，但是跟别人破碎大肠杆菌的比起来要浑浊很多）因此我感觉破碎效果不好。
文献中对于枯草芽孢杆菌的超声破碎要么是一笔带过，要么就是用的跟大肠杆菌一样的条件，我想问问有做过超声破碎枯草芽孢杆菌的朋友吗？？

有的文献中使用EDTA来破壁，有的实验室用溶菌酶，哪一种破碎方式比较好呢？

我是想收集菌体内的蛋白酶，如果超声时间过长（比如50min）是否会影响酶活性呢？还有超声时尽管是在冰浴中，会不会菌液内会瞬时高温导致酶失活呢？

谢谢啦！

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-9 at 11:46 ]

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1楼 2009-10-08 23:54:10

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HarveyWang

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引用回帖:

Originally posted by zeroron at 2009-10-8 23:54:
请问一下如何对枯草芽孢杆菌破壁
一般文献中的超声破壁条件都是革兰氏阴性菌大肠杆菌的条件，运用相同条件（200kw或300kw，5s/5s 50min或者300kw， 3s/3s 30min）发现破碎后的菌悬液均不够澄清（当然要比超声之前 ...

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我没破过，不知道哦。