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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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zeroron

银虫 (小有名气)

[交流] 请问如何对枯草芽孢杆菌破壁

请问一下如何对枯草芽孢杆菌破壁
一般文献中的超声破壁条件都是革兰氏阴性菌大肠杆菌的条件,运用相同条件(200kw或300kw,5s/5s 50min或者300kw, 3s/3s 30min)发现破碎后的菌悬液均不够澄清(当然要比超声之前的澄清一些,但是跟别人破碎大肠杆菌的比起来要浑浊很多)因此我感觉破碎效果不好。
文献中对于枯草芽孢杆菌的超声破碎要么是一笔带过,要么就是用的跟大肠杆菌一样的条件,我想问问有做过超声破碎枯草芽孢杆菌的朋友吗??

有的文献中使用EDTA来破壁,有的实验室用溶菌酶,哪一种破碎方式比较好呢?

我是想收集菌体内的蛋白酶,如果超声时间过长(比如50min)是否会影响酶活性呢?还有超声时尽管是在冰浴中,会不会菌液内会瞬时高温导致酶失活呢?

谢谢啦!

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-9 at 11:46 ]
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枯草芽孢

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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zeroron at 2009-10-8 23:54:
请问一下如何对枯草芽孢杆菌破壁
一般文献中的超声破壁条件都是革兰氏阴性菌大肠杆菌的条件,运用相同条件(200kw或300kw,5s/5s 50min或者300kw, 3s/3s 30min)发现破碎后的菌悬液均不够澄清(当然要比超声之前 ...

好问题哦!建议版主给加金币。

我没破过,不知道哦。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2009-10-09 10:25:50
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爱朝霞

金虫 (小有名气)

用纤维素酶试试吧!
因知识结识好友,让我们共同进步。
3楼2009-10-09 11:15:40
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09021122

木虫 (正式写手)

121℃高温蒸汽灭菌
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
4楼2009-10-09 13:06:29
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主

建议试试酶溶法
如果没有人帮助你,那么你就去帮助别人。
5楼2009-10-09 13:25:21
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gxsulong

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 10-9 19:45
我做过表达宿主W800的破胞:用溶菌酶先裂解3h,然后用细菌裂解液处理。效果还可以,不过不知道对你的合不合适。
霉菌
6楼2009-10-09 15:42:50
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gandalf886

银虫 (小有名气)

可以用一种仪器叫Frech Press
7楼2009-10-09 18:52:48
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zeroron

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by amisking at 2009-10-9 13:25:
建议试试酶溶法

超声破碎的方法不好吗??
8楼2009-10-10 09:50:50
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