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请问如何对枯草芽孢杆菌破壁
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请问一下如何对枯草芽孢杆菌破壁 一般文献中的超声破壁条件都是革兰氏阴性菌大肠杆菌的条件,运用相同条件(200kw或300kw,5s/5s 50min或者300kw, 3s/3s 30min)发现破碎后的菌悬液均不够澄清(当然要比超声之前的澄清一些,但是跟别人破碎大肠杆菌的比起来要浑浊很多)因此我感觉破碎效果不好。 文献中对于枯草芽孢杆菌的超声破碎要么是一笔带过,要么就是用的跟大肠杆菌一样的条件,我想问问有做过超声破碎枯草芽孢杆菌的朋友吗?? 有的文献中使用EDTA来破壁,有的实验室用溶菌酶,哪一种破碎方式比较好呢? 我是想收集菌体内的蛋白酶,如果超声时间过长(比如50min)是否会影响酶活性呢?还有超声时尽管是在冰浴中,会不会菌液内会瞬时高温导致酶失活呢? 谢谢啦! [ Last edited by 350784478 on 2009-10-9 at 11:46 ] |
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