24小时热门版块排行榜    

查看: 974  |  回复: 6
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 veronica5129 的 1 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

veronica5129

铜虫 (初入文坛)

[交流] G418筛选Hela 细胞

虫友们好!我用质粒转染Hela cell,转然2天后开始用G418筛选,筛选浓度600ug/ml.根据文献报道,2周即可筛选出细胞克隆。我在筛选第12天发现细胞死亡很多,剩余的细胞又不是细胞克隆的样子,而是以个别细胞存在。请有经验的虫友指点一下是怎么回事?谢谢
回复此楼
性格决定命运
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zc450zc

金虫 (正式写手)


veronica5129(金币+1):谢谢参与
自己多做几次试验再试试吧 不要太相信文献了
5楼2009-10-09 08:35:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
veronica5129(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+2,VIP+0): 10-8 21:36
不要太相信文献,有时候培养条件或者细胞来源的不一样,也会有差异的,你应该先摸一个剂量梯度,100~1000,也就是一个数量级里面摸
最低致死的那个才是ok的

然后不是细胞克隆的样子是什么意思呢?分开的?
有时候就这样的,因为有的细胞转染效率很高~~
2楼2009-10-08 21:34:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kakicoco

铁虫 (小有名气)

★ ★
veronica5129(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+1,VIP+0): 10-8 22:17
细胞克隆就是一个细胞长成的一堆细胞,一般情况下有这堆细胞长到50-100个之后就可以挑了
3楼2009-10-08 22:06:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

其实,如果不长成克隆,我会先将细胞消化然后制成单细胞悬液到96孔板,使每个孔只有1个细胞,这样相当于也在单克隆化
4楼2009-10-08 22:44:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +8 majunge000 2026-08-10 9/450 2026-08-12 22:17 by 虫友是什么虫
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +10 Tide man 2026-08-11 10/500 2026-08-12 20:59 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] 不应该看fileCode +5 且听虎啸 2026-08-12 6/300 2026-08-12 16:26 by Tide man
[基金申请] 长年满屏的广告,版主太不责任了。基金也等的急 +4 gltch 2026-08-12 4/200 2026-08-12 16:08 by eulota
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
信息提示
请填处理意见