24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 832  |  回复: 6
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 veronica5129 的 1 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会

veronica5129

铜虫 (初入文坛)

[交流] G418筛选Hela 细胞

虫友们好!我用质粒转染Hela cell,转然2天后开始用G418筛选,筛选浓度600ug/ml.根据文献报道,2周即可筛选出细胞克隆。我在筛选第12天发现细胞死亡很多,剩余的细胞又不是细胞克隆的样子,而是以个别细胞存在。请有经验的虫友指点一下是怎么回事?谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

性格决定命运
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
veronica5129(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+2,VIP+0): 10-8 21:36
不要太相信文献,有时候培养条件或者细胞来源的不一样,也会有差异的,你应该先摸一个剂量梯度,100~1000,也就是一个数量级里面摸
最低致死的那个才是ok的

然后不是细胞克隆的样子是什么意思呢?分开的?
有时候就这样的,因为有的细胞转染效率很高~~
2楼2009-10-08 21:34:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kakicoco

铁虫 (小有名气)

★ ★
veronica5129(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+1,VIP+0): 10-8 22:17
细胞克隆就是一个细胞长成的一堆细胞,一般情况下有这堆细胞长到50-100个之后就可以挑了
3楼2009-10-08 22:06:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

其实,如果不长成克隆,我会先将细胞消化然后制成单细胞悬液到96孔板,使每个孔只有1个细胞,这样相当于也在单克隆化
4楼2009-10-08 22:44:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zc450zc

金虫 (正式写手)


veronica5129(金币+1):谢谢参与
自己多做几次试验再试试吧 不要太相信文献了
5楼2009-10-09 08:35:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

veronica5129

铜虫 (初入文坛)

谢谢大家,主要是我不确定现在存活下来的细胞是否就是筛选得到阳性细胞,出现这种情况是没有筛选成功吗?细胞筛选浓度之前已确定为600ug/ml
性格决定命运
6楼2009-10-09 11:56:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louyiceng

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主


veronica5129(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-10-08 21:34:41:
不要太相信文献,有时候培养条件或者细胞来源的不一样,也会有差异的,你应该先摸一个剂量梯度,100~1000,也就是一个数量级里面摸
最低致死的那个才是ok的

然后不是细胞克隆的样子是什么意思呢?分开的?
有 ...

谢谢
7楼2010-03-18 07:59:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 veronica5129 的主题更新
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿211,0703化学305分求调剂 +26 严西西戏 2026-04-06 33/1650 2026-04-11 23:01 by 314126402
[考研] 材料工程日语考生求调剂 +7 0856?调剂 2026-04-10 7/350 2026-04-11 21:33 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂,262机械专硕 +7 嗯yyl 2026-04-08 7/350 2026-04-11 12:40 by zhq0425
[考研] 085404 293求调剂 +8 勇远库爱314 2026-04-08 8/400 2026-04-11 12:08 by zhq0425
[考研] 0854求调剂 +7 assdll 2026-04-05 7/350 2026-04-11 10:34 by Delta2012
[考研] 342电子信息专硕求调剂 +9 你让我怎么荔枝 2026-04-10 10/500 2026-04-11 08:33 by zhq0425
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[考研] 265求调剂 +12 风说她早忘了 2026-04-10 13/650 2026-04-10 18:56 by chemisry
[考研] 301求调剂 +5 149. 2026-04-10 5/250 2026-04-10 15:45 by 柴小白
[考研] 314求调剂 +14 weltZeng 2026-04-09 14/700 2026-04-09 23:14 by wolf97
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:01 by Orcid
[考研] 本科郑州大学,一志愿华东师范大学282求调剂 +23 熊哥xtk 2026-04-07 26/1300 2026-04-09 17:17 by 18446523
[考研] 一志愿西南大学生物学学硕344 求生物学相关调剂/生物与医药 +7 超人不会飞@ 2026-04-08 7/350 2026-04-09 09:35 by gong120082
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
[考研] 277求调剂 +4 考研调剂lxh 2026-04-06 6/300 2026-04-08 10:40 by 逆水乘风
[考研] 0857大类环境工程B区求调剂 +3 龚禹铭 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 327求调剂 +4 拾光任染 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:16 by 南航~万老师
[考研] 315求调剂 +5 &123456789 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:55 by nepu_uu
[考研] 求调剂到0856材料工程 +3 程9915 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:15 by 蓝云思雨
[考研] 296求调剂 +3 汪!?! 2026-04-05 5/250 2026-04-05 17:38 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见