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流动相选择甲醇还是乙腈？
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乙腈/水和甲醇/水是反相色谱中最常见的流动相组成。那么是甲醇好还是乙腈好呢？ 当然，这个问题并没有一个确定的答案。两者的选择性差异可能对色谱分离起到重要的作用。例如，一些溶质可以形成甲醇盐，而乙腈可以稳定八面体铜离子、镉离子和锌离子络合物。下面列出了两种溶剂的一般差异： 乙腈具有以下特点： 低黏度 更好的动力学。 相比于甲醇/水混合液，乙腈/水混合液具有更低的背压。 洗脱能力强 空气的溶解度低 紫外吸收率低（液相检测方法） 在水溶液中只有较小的pH偏差 乙腈是较好的溶剂化试剂 与甲醇相比，乙腈与水的化学性质差异更大 比甲醇毒性更大 在低pH条件下更有利于碱的分离 由于乙腈具有上述的特点，因此具有以下优势： 色谱峰尖锐 对密封件和色谱柱的磨损较少 较低的溶剂消耗：与甲醇相比，在较低的乙腈百分比下就会有相同的洗脱强度（即洗脱能力强） 与含甲醇的流动相相比，硅胶在含乙腈的流动相中更不容易被溶解(乙腈的极性小于甲醇) 空气残留更少，脱气更加容易 在195 ~ 200 nm检测效果较好（液相检测方法） 特别是对离子型化合物的分离具有更好的重现性 离子色谱选择性差异更容易获得 微生物在系统中的生长受到阻碍 甲醇具有以下特点： 甲醇/水混合液使密封件更快地进入其溶胀状态 气味较轻，且毒性较小 对盐类有更好的溶解性（如流动相添加剂中的甲酸铵/乙酸铵等） 在较老批次的乙腈中，杂质(丙烯腈、甲基丙烯腈)会产生"鬼影"峰。而对于甲醇来说，该问题知之甚少。 在碱性pH下更有利于碱的分离 甲醇/水混合液中220 ~ 230 nm以上的基线噪声较低。（液相方法检测） 其优点主要为： 设备更快进入工作状态， 甲醇的存放期更长 更好的工作环境 对人员更加友好 即使在100 %甲醇的梯度条件下，盐类析出的危险性也较低 结论：显然，对于大多数用户来说，乙腈的利大于弊。大约70 %的反相分离中使用乙腈。显然，对于大多数用户来说，乙腈的优势大于劣势。大约70 %的反相分离中使用乙腈。但是在实际过程中，不同化合物在甲醇和乙腈的离子化能力不一样；同时由于乙腈的洗脱能力较强，在某些难分离的样本中，乙腈可能无法分开所有的分析物。因此，我们在实际分析过程仍需要结合实际情况，多加尝试。 附：甲醇的致死量为30毫升，乙腈的致死量为5毫升，所以乙腈的毒性会更大一些。两者中毒的症状如下：乙腈中毒会出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻、胸闷、胸痛、疲倦、乏力等症状，严重时也出现呼吸抑制、血压下降、昏迷、抽搐等。其脉搏心率皆减慢，呼吸亦较慢，面色多呈苍白，常引起蛋白尿等肾脏损伤表现。甲醇主要作用于神经系统,具有明显的麻醉作用,可引起脑水肿。甲醇在体内抑制某些氧化酶系统，抑制糖的需氧分解，造成乳酸和其他有机酸积聚以及甲酸累积,而引起酸中毒。 |
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