24小时热门版块排行榜    

查看: 469  |  回复: 5
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wsmcc

金虫 (小有名气)

[交流] 质粒单切三条带,双切两条带

不知道为什么,最近做了个重组质粒,提取质粒后做了单切和双切,但是单切后竟然有三条带,一条与空质粒酶切前相同,一条带与空质粒单切大小相同,一条带很大。双切后,一条与空质粒单切后相同,一条也是很大,和单切后那条大的相同。但是重组的没经过酶切的质粒跑出来和空质粒一样,没有大的条带,没看出什么问题。为什么质粒酶切越切越大呢?
图片为:DL2000,空质粒,空质粒单切,空质粒单切,空质粒双切,空质粒,空质粒单切,空质粒单切,空质粒双切,DL15000,重组质粒,重组质粒单切,重组质粒单切,重组质粒双切,重组质粒,重组质粒单切,重组质粒单切,重组质粒双切。
希望我描述的足够清楚,请高人指教,谢谢!

[ Last edited by wsmcc on 2009-10-7 at 21:10 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


wsmcc(金币+1):谢谢参与
==b
倒过来看电泳图真不方便~
我个人感觉是重组质粒有些没抽干净或者酶切不充分
4楼2009-10-08 09:22:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

695

木虫 (职业作家)


wsmcc(金币+1):谢谢参与
不要看带的多少,有些可能是酶切不充分模板剩下的,祝顺利
3楼2009-10-08 00:48:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaolixia0814

金虫 (小有名气)


wsmcc(金币+1):谢谢参与
wsmcc(金币+1): 2010-03-12 10:07
你的重组质粒比空质粒大?差别多大?电泳上看感觉差不多,有一点可以肯定就是酶切不完全
5楼2009-10-08 09:45:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsmcc

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhaolixia0814 at 2009-10-8 09:45:
你的重组质粒比空质粒大?差别多大?电泳上看感觉差不多,有一点可以肯定就是酶切不完全

重组质粒比空质粒大400bp,但是并没有看到切掉的目的基因。酶切应该是完全的,因为双切的质粒是没有3000bp的条带,而相同质粒量和相同的酶切时间的单切却有条带。
这幅图中的空质粒是别人给的现成的,我今天又自己做了转空质粒,提取质粒后单、双切结果仍是这样。我怀疑我的感受态不知道出什么问题了,虽然是氨苄抗性,阴性对照也无菌落长出,但是我觉得可能还是污染了某些东西。
6楼2009-10-08 18:37:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考研] 274求调剂 +4 顾九笙要谦虚 2026-03-24 4/200 2026-03-24 16:28 by barlinike
[考研] 08工学调剂 +9 用户573181 2026-03-20 14/700 2026-03-24 16:21 by liujinyu80
[考研] 321求调剂 +4 Ymlll 2026-03-24 4/200 2026-03-24 14:44 by sprinining
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 07化学280分求调剂 +4 722865 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:01 by chixmc
[考研] 材料专业求调剂 +11 hanamiko 2026-03-18 11/550 2026-03-23 23:12 by peike
[考研] 一志愿国科过程所081700,274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-18 6/300 2026-03-22 20:18 by edmund7
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
信息提示
请填处理意见