24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 491  |  回复: 5
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wsmcc

金虫 (小有名气)

[交流] 质粒单切三条带,双切两条带

不知道为什么,最近做了个重组质粒,提取质粒后做了单切和双切,但是单切后竟然有三条带,一条与空质粒酶切前相同,一条带与空质粒单切大小相同,一条带很大。双切后,一条与空质粒单切后相同,一条也是很大,和单切后那条大的相同。但是重组的没经过酶切的质粒跑出来和空质粒一样,没有大的条带,没看出什么问题。为什么质粒酶切越切越大呢?
图片为:DL2000,空质粒,空质粒单切,空质粒单切,空质粒双切,空质粒,空质粒单切,空质粒单切,空质粒双切,DL15000,重组质粒,重组质粒单切,重组质粒单切,重组质粒双切,重组质粒,重组质粒单切,重组质粒单切,重组质粒双切。
希望我描述的足够清楚,请高人指教,谢谢!

[ Last edited by wsmcc on 2009-10-7 at 21:10 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

695

木虫 (职业作家)


wsmcc(金币+1):谢谢参与
不要看带的多少,有些可能是酶切不充分模板剩下的,祝顺利
3楼2009-10-08 00:48:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


wsmcc(金币+1):谢谢参与
==b
倒过来看电泳图真不方便~
我个人感觉是重组质粒有些没抽干净或者酶切不充分
4楼2009-10-08 09:22:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaolixia0814

金虫 (小有名气)


wsmcc(金币+1):谢谢参与
wsmcc(金币+1): 2010-03-12 10:07
你的重组质粒比空质粒大?差别多大?电泳上看感觉差不多,有一点可以肯定就是酶切不完全
5楼2009-10-08 09:45:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsmcc

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhaolixia0814 at 2009-10-8 09:45:
你的重组质粒比空质粒大?差别多大?电泳上看感觉差不多,有一点可以肯定就是酶切不完全

重组质粒比空质粒大400bp,但是并没有看到切掉的目的基因。酶切应该是完全的,因为双切的质粒是没有3000bp的条带,而相同质粒量和相同的酶切时间的单切却有条带。
这幅图中的空质粒是别人给的现成的,我今天又自己做了转空质粒,提取质粒后单、双切结果仍是这样。我怀疑我的感受态不知道出什么问题了,虽然是氨苄抗性,阴性对照也无菌落长出,但是我觉得可能还是污染了某些东西。
6楼2009-10-08 18:37:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +11 何气正 2026-04-13 12/600 2026-04-13 20:14 by 学员JpLReM
[考研] 302求调剂 +10 易!? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 材料085601调剂 +30 何润采123 2026-04-10 32/1600 2026-04-13 09:51 by szhize
[考研] 药学求调剂 +3 RussHu 2026-04-12 4/200 2026-04-12 17:49 by 陈皮皮
[考研] 0854调剂 +12 长弓傲 2026-04-09 13/650 2026-04-12 09:56 by 逆水乘风
[考研] 305求调剂 +7 玛卡巴卡boom 2026-04-11 7/350 2026-04-12 07:35 by zhouxiaoyu
[考研] 299求调剂 +8 ZVVZ13 2026-04-08 8/400 2026-04-12 00:40 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿厦大0856,306求调剂 +15 Bblinging 2026-04-11 15/750 2026-04-11 22:53 by 314126402
[考研] 296求调剂 +8 汪!?! 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:02 by 逆水乘风
[考研] 农学0904 312求调剂 +3 Say Never 2026-04-11 3/150 2026-04-11 17:22 by daydayup2005
[考研] 一志愿985机械学硕380求调剂 +5 关关雎鸠10 2026-04-11 5/250 2026-04-11 10:10 by 知念。A
[考研] 298求调剂 +9 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 11/550 2026-04-11 09:35 by zhq0425
[考研] 287求调剂 +15 Fnhc 2026-04-07 21/1050 2026-04-10 19:09 by chemisry
[考研] 一志愿中南大学物理学,英一66,求调剂 +4 长烟旖旎 2026-04-08 5/250 2026-04-10 10:31 by 颖果儿
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 278求调剂 +27 范婷娜 2026-04-07 31/1550 2026-04-09 20:49 by zhouxiaoyu
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
[考研] 277、学硕,求调剂 数一104, +11 瓶子PZ 2026-04-07 12/600 2026-04-07 23:30 by 一只好果子?
[考研] 331求调剂 +5 张元一 2026-04-07 6/300 2026-04-07 22:13 by hemengdong
信息提示
请填处理意见