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荧光定量的两次结果相差太大
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各位贴友们好，目前在做基因干扰，用的脂质体转染构建的干扰RNA质粒（细胞是3T3-L1），把干扰后的细胞收完之后提Rna，之后反转录做荧光定量。但是同一个Rna模板反转录的，用同一个引物做的定量结果，结果两次定量分析结果相差较大，这是问题1。然后空白对照和阴性对照的基因表达量也相差挺大的，这是问题2。 整个实验，转染是导师做的，我今年研一，她怕我做不好。然后后面的提取Rna，反转录，荧光定量是我做的。结果不理想，导师老是问我为啥会这样，我其实真的不知道，都是按照步骤来的…… 各位亲们有没有遇到类似的情况，有的话请不吝指教，拜谢了！ |
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