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我能做SMART RACE 么
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各位专家, 我的RNA照片在此,有同学说我的RNA讲解了,因为,28S不亮,5S太亮。 不能做SMART RACE 么? |
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3楼2009-10-03 00:48:29
2楼2009-10-02 17:21:46
mascotte
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1998.9
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- 专业: 生物化学
4楼2009-10-03 06:21:50
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
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楼主要想省钱,可以按照试剂盒的说明,自己合成引物订购相关的酶,smartRACE试剂盒自己订购酶花的钱可能会省2/3,我没细算过,但是我们这里好多人都是自己定酶回来然后按试剂盒的操作,但是酶必须是一些大公司比如invitrogen或者clontech的,smartRACE的原理就是利用了MMLV的末端转移酶活性,假如你定的酶没有此活性,那就歇菜了,来合成5‘和3’第一链,其次PCR扩增时引物要设计高tm值的引物使用热启动酶进行PCR,因其原理的限制有时得不到全长。 相比之下新RACE(例如invitrogen)就很强,但也很麻烦,不过效率高一点。 至于能不能做,在于你自己的机遇还有你们实验室的条件,至于楼上说的2:1,有些物种得到的RNA28:18就不是2:1,所以也不要太迷信。 |
5楼2009-10-03 16:16:17














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