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我能做SMART RACE 么
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各位专家， 我的RNA照片在此，有同学说我的RNA讲解了，因为，28S不亮，5S太亮。 不能做SMART RACE 么？ |
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2楼2009-10-02 17:21:46
3楼2009-10-03 00:48:29
mascotte
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 2
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- 金币: 1998.9
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- 专业: 生物化学
4楼2009-10-03 06:21:50
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
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楼主要想省钱，可以按照试剂盒的说明，自己合成引物订购相关的酶，smartRACE试剂盒自己订购酶花的钱可能会省2/3，我没细算过，但是我们这里好多人都是自己定酶回来然后按试剂盒的操作，但是酶必须是一些大公司比如invitrogen或者clontech的，smartRACE的原理就是利用了MMLV的末端转移酶活性，假如你定的酶没有此活性，那就歇菜了，来合成5‘和3’第一链，其次PCR扩增时引物要设计高tm值的引物使用热启动酶进行PCR，因其原理的限制有时得不到全长。 相比之下新RACE（例如invitrogen）就很强，但也很麻烦，不过效率高一点。 至于能不能做，在于你自己的机遇还有你们实验室的条件，至于楼上说的2：1，有些物种得到的RNA28：18就不是2：1，所以也不要太迷信。 |
5楼2009-10-03 16:16:17
6楼2009-10-05 12:18:21
