应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 我能做SMART RACE 么
61/1返回列表
查看: 304  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

gogagaover

新虫 (初入文坛)

[交流] 我能做SMART RACE 么

各位专家，

我的RNA照片在此，有同学说我的RNA讲解了，因为，28S不亮，5S太亮。

不能做SMART RACE 么？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-10-02 11:20:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gastrodia

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+5,VIP+0): 10-2 17:55
从你电泳图可以看出RNA有部分的降解，做RACE还是可以试试，如果降解的RNA中你的目的RNA没有降解就会得到好的结果，反之则不行，但RACE还是可以试试的，但你要明白clontech的技术有时不能得到全长，
赞一下(11人) 回复此楼
2楼2009-10-02 17:21:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bambino

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
做那东西，有什么用？？分子的东西就是骗学生的
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-10-03 00:48:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mascotte

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般来说，28S：18S的比列为2：1算是不错的。楼主这样的RNA降解了不少，最好不要做RACE了，当然样品宝贵的话另当别论。SMART RACE可以将细胞所有的mRNA扩增出来做库，所以RNA的质量是一定要有保证的。而且国内的smart RACE试剂盒通常在10次4000左右价格范围内，每次SMART RACE实验试剂盒就要花费 400-500RMB，如果有这么两三次不成功的话是会很头疼的，所以每步都要严格质量控制。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-10-03 06:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gastrodia

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼主要想省钱，可以按照试剂盒的说明，自己合成引物订购相关的酶，smartRACE试剂盒自己订购酶花的钱可能会省2/3，我没细算过，但是我们这里好多人都是自己定酶回来然后按试剂盒的操作，但是酶必须是一些大公司比如invitrogen或者clontech的，smartRACE的原理就是利用了MMLV的末端转移酶活性，假如你定的酶没有此活性，那就歇菜了，来合成5‘和3’第一链，其次PCR扩增时引物要设计高tm值的引物使用热启动酶进行PCR，因其原理的限制有时得不到全长。
相比之下新RACE（例如invitrogen）就很强，但也很麻烦，不过效率高一点。

至于能不能做，在于你自己的机遇还有你们实验室的条件，至于楼上说的2：1，有些物种得到的RNA28：18就不是2：1，所以也不要太迷信。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2009-10-03 16:16:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gogagaover

新虫 (初入文坛)
感谢各位专家。

我已经买了SMART RACE 试剂盒，老板一看我的RNA， 又听其他学生说不能做，因此不敢让我做了。

可是我自己觉得挺好啊
赞一下 回复此楼
6楼2009-10-05 12:18:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 gogagaover 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭