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牛腻流利

新虫 (小有名气)

[求助] 质粒灵敏度跑不出来已有1人参与

合成的含病毒目的片段的质粒摇菌后提取跑QPCR,10倍倍比稀释,第一次跑第一个浓度(2*10的7次方)ct值有16;第二次第三次跑就到17~18,导致灵敏度(2*10的1次方)ct值高于38不合格。
质粒不是很稳定吗,第一次跑完了也是-20度冻存的。
第二、三次和第一次的区别就是第一次用96孔板和RNase-free水稀释质粒标曲,第二、三次用的八连管和专门的dilution稀释标曲,但是这些差别应该不是问题所在吧。
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一点也不简单

新虫 (知名作家)

低浓度本来就不稳定,泊松分布原理

发自小木虫Android客户端
2楼2023-05-11 18:10:32
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