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凉宫春日团长

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR的线性质粒片段连接不上已有3人参与

我想去除质粒上的十几个碱基,所以在这十几个碱基的两端设计了引物,然后加上同一个酶切位点,计划酶切后直接连接,让酶切后的PCR线性质粒连接成环。用的sal1酶切位点,连接用的T4。
连接产物跑胶后,只看到了线性质粒条带,没有环状的。菌落PCR也没有阳性的。
各位大佬有做过的嘛,可以指点一下吗。

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five56

新虫 (小有名气)

5楼2023-07-05 20:46:51
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