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liaobi

金虫 (正式写手)

[交流] 实验问题。超级感谢

我要水稻原生质体提取技术和培养技术。谢谢！非常感谢！
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1楼 2009-09-24 22:25:07
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apzhough

铁虫 (小有名气)
用１６个基因型水稻成熟胚在ＭＳ和Ｎ６培养基上筛选建成悬浮细胞系９个，原生质体再生植株３个。使用一步法或两步法较常规的分步法缩短建成悬浮细胞系时间２０～３０天。使用“三合一”培养基（即Ｎ６大量元素、ＭＳ微量元素和Ｂ５有机物等）和固液双相培养法较琼脂糖包埋法及液体浅层培养法显著提高原生质体培养的植板率。
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9楼2009-09-28 14:54:53
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liaobi

金虫 (正式写手)
原生质体提取，难得没有人会吗？
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2楼2009-09-28 13:22:48
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fanghuizhu

金虫 (著名写手)
好像真的没人会呀，大家赶紧关注啊，把贴顶上去让大家来解决
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3楼2009-09-28 13:30:56
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poscher

木虫 (正式写手)

一生有Li

关于玉米原生质体的提取

★ ★ ★ ★ ★
liaobi(金币+5,VIP+0): 10-2 15:01
一、酶解液的组成：
1 纤维素酶0.7% 果胶酶0.5% 山梨醇14% 氯化钙5mmol•L-1, pH5.8
二、漂洗液的组成：山梨醇14%，硝酸钾 1mmol•L-1, 磷酸二氢钾0.2 mmol•L-1, 氯化钙0.5mmol•L-1,
硫酸铜0.01 µmol•L-1
三、材料预处理： 取黄化叶片，去中脉后放入25％的蔗糖溶液中处理15～20min，使其发生质壁分离，
然后用于酶解
四、进行两次酶解 在第二次酶解结束后，将叶片取出放于漂洗液中漂洗抖动使原生质体释放出来，然后将漂洗液在 1500 rpm离心 5min，沉淀即为原生质体，实验证明在离心力为2500rpm,时间5min时，原生质体得到率最高
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与人为善结善缘虚心学人纳人言自谦自淡薄名利莫争莫狂忍为先
5楼2009-09-28 14:03:35
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