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liaobi

金虫 (正式写手)

[交流] 实验问题。超级感谢

我要水稻原生质体提取技术和培养技术。谢谢！非常感谢！
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1楼 2009-09-24 22:25:07
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liaobi

金虫 (正式写手)
原生质体提取，难得没有人会吗？
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2楼2009-09-28 13:22:48
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fanghuizhu

金虫 (著名写手)
好像真的没人会呀，大家赶紧关注啊，把贴顶上去让大家来解决
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3楼2009-09-28 13:30:56
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myhzy2819

金虫 (著名写手)
友情帮顶一下吧~
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4楼2009-09-28 13:55:48
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poscher

木虫 (正式写手)

一生有Li

关于玉米原生质体的提取

★ ★ ★ ★ ★
liaobi(金币+5,VIP+0): 10-2 15:01
一、酶解液的组成：
1 纤维素酶0.7% 果胶酶0.5% 山梨醇14% 氯化钙5mmol•L-1, pH5.8
二、漂洗液的组成：山梨醇14%，硝酸钾 1mmol•L-1, 磷酸二氢钾0.2 mmol•L-1, 氯化钙0.5mmol•L-1,
硫酸铜0.01 µmol•L-1
三、材料预处理： 取黄化叶片，去中脉后放入25％的蔗糖溶液中处理15～20min，使其发生质壁分离，
然后用于酶解
四、进行两次酶解 在第二次酶解结束后，将叶片取出放于漂洗液中漂洗抖动使原生质体释放出来，然后将漂洗液在 1500 rpm离心 5min，沉淀即为原生质体，实验证明在离心力为2500rpm,时间5min时，原生质体得到率最高
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与人为善结善缘虚心学人纳人言自谦自淡薄名利莫争莫狂忍为先
5楼2009-09-28 14:03:35
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poscher

木虫 (正式写手)

一生有Li

蝴蝶兰原生质体提取方法的优化

★ ★ ★
liaobi(金币+3,VIP+0): 10-2 15:02
以蝴蝶兰自交品种NOⅡ的无菌苗叶片为试材，采用单因素试验和正交试验，比较不同酶的种类、酶液浓度、材料和酶液的比例、渗透压、酶解时间及纯化条件对原生质体产量和活性的影响，并用荧光显微镜观察去壁情况。结果表明：在同一种条件下1g蝴蝶兰叶片加入10mL酶解液中，酶解液含1．0％纤维素酶R-10，1．0％果胶酶，0．5mol·L^-1甘露醇，酶解3h，有活力的原生质体产量最高，其产量为1．3×10^5个·g^-1，活性迭81．90％。
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与人为善结善缘虚心学人纳人言自谦自淡薄名利莫争莫狂忍为先
6楼2009-09-28 14:03:56
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poscher

木虫 (正式写手)

一生有Li

谷子胚性愈伤组织粘液提取物对原生质体培养的影响

★ ★
liaobi(金币+2,VIP+0): 10-2 15:02
将谷子胚性愈伤组织粘液提取物添加到谷子原生质体培养基中，其对原生质体培养的影响表明该提取物有助于原生质体形成细胞壁；并且该类有粘液分泌的念伤组织的原生质体游离所需的酶液浓度低、处理时间短。由原生质体形成完整细胞的数量在一定范围内与谷子原生质体培养的植板率相对应；通过增加形成完整细胞的数量可较大幅度地提高原生质体培养的植板率。
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与人为善结善缘虚心学人纳人言自谦自淡薄名利莫争莫狂忍为先
7楼2009-09-28 14:04:32
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poscher

木虫 (正式写手)

一生有Li

酶解提取梨花粉原生质体的方法

本发明梨花粉和花粉管原生质体的提取方法，涉及植物体细胞壁的破除和原生质体获取的方法，是属于生物化学及食品科学领域；本发明的主要是依据植物花粉细胞壁的特性来获取完整的花粉或花粉管原生质体，而且保持原有的活力。采用两步法获取花粉及花粉管原生质体，步骤主要包括采集成熟花粉，在花粉培养基中培养３～３．５ｈ后，进行酶解反应５０ｍｉｎ后、离心，就能获得完整的具有活力的花粉粒（管）的原生质体，而且该原生质体仍然保持原有活性，适合于作为花粉及花粉管的生理生化及细胞信号转导特性研究的实验材料。
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与人为善结善缘虚心学人纳人言自谦自淡薄名利莫争莫狂忍为先
8楼2009-09-28 14:05:02
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apzhough

铁虫 (小有名气)
用１６个基因型水稻成熟胚在ＭＳ和Ｎ６培养基上筛选建成悬浮细胞系９个，原生质体再生植株３个。使用一步法或两步法较常规的分步法缩短建成悬浮细胞系时间２０～３０天。使用“三合一”培养基（即Ｎ６大量元素、ＭＳ微量元素和Ｂ５有机物等）和固液双相培养法较琼脂糖包埋法及液体浅层培养法显著提高原生质体培养的植板率。
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9楼2009-09-28 14:54:53
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