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liaobi

金虫 (正式写手)

[交流] 实验问题。超级感谢

我要水稻原生质体提取技术和培养技术。谢谢！非常感谢！
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1楼 2009-09-24 22:25:07
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fanghuizhu

金虫 (著名写手)
好像真的没人会呀，大家赶紧关注啊，把贴顶上去让大家来解决
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3楼2009-09-28 13:30:56
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liaobi

金虫 (正式写手)
原生质体提取，难得没有人会吗？
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2楼2009-09-28 13:22:48
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poscher

木虫 (正式写手)

一生有Li

关于玉米原生质体的提取

★ ★ ★ ★ ★
liaobi(金币+5,VIP+0): 10-2 15:01
一、酶解液的组成：
1 纤维素酶0.7% 果胶酶0.5% 山梨醇14% 氯化钙5mmol•L-1, pH5.8
二、漂洗液的组成：山梨醇14%，硝酸钾 1mmol•L-1, 磷酸二氢钾0.2 mmol•L-1, 氯化钙0.5mmol•L-1,
硫酸铜0.01 µmol•L-1
三、材料预处理： 取黄化叶片，去中脉后放入25％的蔗糖溶液中处理15～20min，使其发生质壁分离，
然后用于酶解
四、进行两次酶解 在第二次酶解结束后，将叶片取出放于漂洗液中漂洗抖动使原生质体释放出来，然后将漂洗液在 1500 rpm离心 5min，沉淀即为原生质体，实验证明在离心力为2500rpm,时间5min时，原生质体得到率最高
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与人为善结善缘虚心学人纳人言自谦自淡薄名利莫争莫狂忍为先
5楼2009-09-28 14:03:35
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poscher

木虫 (正式写手)

一生有Li

蝴蝶兰原生质体提取方法的优化

★ ★ ★
liaobi(金币+3,VIP+0): 10-2 15:02
以蝴蝶兰自交品种NOⅡ的无菌苗叶片为试材，采用单因素试验和正交试验，比较不同酶的种类、酶液浓度、材料和酶液的比例、渗透压、酶解时间及纯化条件对原生质体产量和活性的影响，并用荧光显微镜观察去壁情况。结果表明：在同一种条件下1g蝴蝶兰叶片加入10mL酶解液中，酶解液含1．0％纤维素酶R-10，1．0％果胶酶，0．5mol·L^-1甘露醇，酶解3h，有活力的原生质体产量最高，其产量为1．3×10^5个·g^-1，活性迭81．90％。
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与人为善结善缘虚心学人纳人言自谦自淡薄名利莫争莫狂忍为先
6楼2009-09-28 14:03:56
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