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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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tychenxy

金虫 (正式写手)

[交流] 【交流】初接触HPLC时遇到的问题

大家好!
我刚接触HPLC,每个样品做两次重复,在处理数据时(主要是保留时间和峰面积)遇到一些问题,
峰面积差别较大时是不是代表不同的物质呢?
两个重复的数据(保留时间和峰面积)如何确定为同种物质?主要看保留时间还是峰面积?因为有时保留时间很接近但峰面积却差别较大,或者峰面积差不多但保留时间相差较大如0.2s ?
实在感到很困惑,谢谢各位大侠帮忙!

[ Last edited by jw227 on 2009-9-24 at 09:14 ]
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dezhikong

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
高效液相判断是否是同一物质,主要看保留时间,也可以在样品中加入标准品看峰高变化,当然紫外吸收图谱也可以辅证。
6楼2009-09-25 14:13:13
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笨学生

金虫 (正式写手)

★ ★
tychenxy(金币+1):谢谢参与
tychenxy(金币+1,VIP+0): 9-23 20:39
当然是时间!面积与进样量有关!最好再检查一下UV是不是也一样!如果有二极管阵列!影响保留时间的因素比较多,如温度变化等!
2楼2009-09-23 20:38:27
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xf4671566

铁杆木虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~! 9-23 22:56
判断是不是同种物质,主要看保留时间是不是相接近。
要是在没有换流动相,而且机器比较稳定(连续进两针对照品,看看保留时间是不是一样。一样的话或者相差不大于0.2s基本上机器就稳定了)。
还可以把样品和对照品混合在一起,在进一针,观察那个峰面积是不是增大了,这样也可以判断是不是同种物质。
自强不息,努力奋斗!
3楼2009-09-23 20:46:56
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wenyanz

铁虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~! 9-23 22:56
你的检测器有没有DAD检测器啊··,要是有的话看下光谱图是否一样,就知道是不是同一个物质了;
一般同一天内测的样品,保留时间差异不要超过1min,都是可以接受的··
对于峰面积,高效液相色谱法,两份测定结果的相对平均偏差不得大于2%;
4楼2009-09-23 21:34:02
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