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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【交流】初接触HPLC时遇到的问题
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tychenxy

金虫 (正式写手)

[交流] 【交流】初接触HPLC时遇到的问题

大家好！
我刚接触HPLC，每个样品做两次重复，在处理数据时（主要是保留时间和峰面积）遇到一些问题，
峰面积差别较大时是不是代表不同的物质呢？
两个重复的数据（保留时间和峰面积）如何确定为同种物质？主要看保留时间还是峰面积？因为有时保留时间很接近但峰面积却差别较大，或者峰面积差不多但保留时间相差较大如0.2s ?
实在感到很困惑，谢谢各位大侠帮忙！

[ Last edited by jw227 on 2009-9-24 at 09:14 ]
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1楼 2009-09-23 20:33:48
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wenyanz

铁虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！ 9-23 22:56
你的检测器有没有DAD检测器啊··，要是有的话看下光谱图是否一样，就知道是不是同一个物质了；
一般同一天内测的样品，保留时间差异不要超过1min，都是可以接受的··
对于峰面积，高效液相色谱法，两份测定结果的相对平均偏差不得大于2%；
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4楼2009-09-23 21:34:02
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笨学生

金虫 (正式写手)
★ ★
tychenxy(金币+1):谢谢参与
tychenxy(金币+1,VIP+0): 9-23 20:39
当然是时间！面积与进样量有关！最好再检查一下UV是不是也一样！如果有二极管阵列！影响保留时间的因素比较多，如温度变化等！
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2楼2009-09-23 20:38:27
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xf4671566

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！ 9-23 22:56
判断是不是同种物质，主要看保留时间是不是相接近。
要是在没有换流动相，而且机器比较稳定（连续进两针对照品，看看保留时间是不是一样。一样的话或者相差不大于0.2s基本上机器就稳定了）。
还可以把样品和对照品混合在一起，在进一针，观察那个峰面积是不是增大了，这样也可以判断是不是同种物质。
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自强不息，努力奋斗！
3楼2009-09-23 20:46:56
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ysh2225

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！ 9-23 22:56
同意这个，肯定是时间的问题！！领教了
引用回帖:
Originally posted by tychenxy at 2009-9-23 20:33:
大家好！
我刚接触HPLC，每个样品做两次重复，在处理数据时（主要是保留时间和峰面积）遇到一些问题，
峰面积差别较大时是不是代表不同的物质呢？
两个重复的数据（保留时间和峰面积）如何确定为同种物质？主要 ...

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5楼2009-09-23 22:16:45
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