24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1393  |  回复: 27
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 求助SDS-PAGE

请各位虫虫看看,我的胶为什么下面总跑不开呢?总是模糊糊一片的!再就是胶凝的时间长短,有没有关系啊!时不时时间长一点,跑出来的会好点呢?还有胶的厚度,对最后的结果有影响么?现在实验室跑的电泳都是这样,大家知道是怎么回事不啊?很着急啊
回复此楼
I am not a hero , but I served with heroes!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zijing5322

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的带应该在哪个位置啊?没有对照,中间有一段跑的挺好的啊。
我做蛋白质时上样之前都会轻度离心一下,那样跑出来的带没有拖尾现象,比较清楚。
另外,缓冲液的配制很关键。。
5楼2009-09-23 08:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答

hong303030

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
应该是DNA降解的比较厉害,或者是引物的特异性不够好,应该不是跑胶的问题,凝胶我一般是半小时左右吧
2楼2009-09-22 22:37:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sonyk

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
测一下Tris缓冲液的PH值看准不准!

[ Last edited by sonyk on 2009-9-22 at 22:49 ]
3楼2009-09-22 22:48:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wlt728 at 2009-9-22 18:34:
请各位虫虫看看,我的胶为什么下面总跑不开呢?总是模糊糊一片的!再就是胶凝的时间长短,有没有关系啊!时不时时间长一点,跑出来的会好点呢?还有胶的厚度,对最后的结果有影响么?现在实验室跑的电泳都是这样, ...

应该是蛋白质吧。应该设置对照阿。。。
SDS-PAGE的凝胶时间大约是40分钟,时间过长有可能是APS被氧化了,或者是TEMED时间过长或者量太少。如果凝胶时间过长,那么胶的孔径就会有变化(胶的孔径与TEMED的浓度有关,TEMED量大胶的孔径就变小),对结果是有些影响的,但是在一定范围内是没有多大影响的。

胶的厚度应该没有什么影响。我之前做过蛋白的,同时使用两种厚度的胶在一个电泳中跑,结果是没有多大的变化的。
如果你们实验室i的结果都是这样,那么最有可能的就是试剂的问题了。APS的几率比较大,换换新的试剂试试。
另外,你脱色并不完全。你可以将胶放置于开水中,大约煮10分钟吧,直至颜色变淡即可,此方法可以省去你长时间的脱色!
4楼2009-09-22 22:50:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +15 雪逢冬 2026-04-10 15/750 2026-04-14 08:47 by 木木mumu~
[考研] 一志愿哈工大 085600 277 12材科基求调剂 5+5 chenny174 2026-04-10 37/1850 2026-04-14 07:39 by Abskk
[考研] 297求调剂 +22 ORCHID1 2026-04-10 25/1250 2026-04-13 23:11 by pies112
[考研] 本科西工大 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-13 23:08 by pies112
[考研] 0831一轮调剂失败求助 +10 小熊睿睿_s 2026-04-11 10/500 2026-04-12 22:43 by 长弓傲
[考研] 344 材料专业 求调剂211 无地域要求 +8 hualkop 2026-04-11 8/400 2026-04-12 22:24 by fqwang
[考研] 326求调剂 +6 Shansyn 2026-04-10 6/300 2026-04-12 09:46 by hammer3
[考研] 070300化学279求调剂 +19 哈哈哈^_^ 2026-04-08 20/1000 2026-04-11 20:43 by stoner78
[考研] 求调剂 +6 电气300求调剂不 2026-04-08 6/300 2026-04-11 20:14 by 逆水乘风
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 11/550 2026-04-11 19:57 by 逆水乘风
[考研] 求调剂,一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 288求调剂 +15 代fish 2026-04-09 16/800 2026-04-11 10:26 by wwj2530616
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[考研] 282,电气工程专业,求调剂,不挑专业 +9 jggshjkkm 2026-04-10 9/450 2026-04-10 14:55 by 逆水乘风
[考研] 一志愿沪9,326生物学求相关专业调剂 +4 刘墨墨 2026-04-09 4/200 2026-04-10 12:07 by pengliang8036
[考研] 材料化工总分334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 20:19 by maddjdld
[考研] 085404,334分,求调剂 +5 sunjie8888 2026-04-08 8/400 2026-04-09 07:26 by sunjie8888
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
[考研] 22408 266求调剂 +11 masss11222 2026-04-07 14/700 2026-04-08 11:06 by yulian1987
[考研] 388求调剂 +6 四川王涛 2026-04-07 8/400 2026-04-08 00:17 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见