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wlt728铁杆木虫 (著名写手)
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[交流]
求助SDS-PAGE
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请各位虫虫看看，我的胶为什么下面总跑不开呢？总是模糊糊一片的！再就是胶凝的时间长短，有没有关系啊！时不时时间长一点，跑出来的会好点呢？还有胶的厚度，对最后的结果有影响么？现在实验室跑的电泳都是这样，大家知道是怎么回事不啊？很着急啊 |
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应该是蛋白质吧。应该设置对照阿。。。 SDS-PAGE的凝胶时间大约是40分钟，时间过长有可能是APS被氧化了，或者是TEMED时间过长或者量太少。如果凝胶时间过长，那么胶的孔径就会有变化（胶的孔径与TEMED的浓度有关，TEMED量大胶的孔径就变小），对结果是有些影响的，但是在一定范围内是没有多大影响的。 胶的厚度应该没有什么影响。我之前做过蛋白的，同时使用两种厚度的胶在一个电泳中跑，结果是没有多大的变化的。 如果你们实验室i的结果都是这样，那么最有可能的就是试剂的问题了。APS的几率比较大，换换新的试剂试试。 另外，你脱色并不完全。你可以将胶放置于开水中，大约煮10分钟吧，直至颜色变淡即可，此方法可以省去你长时间的脱色！ |
4楼2009-09-22 22:50:06
hong303030
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5楼2009-09-23 08:58:39