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fallstone

应助: (幼儿园)
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[交流] 大肠杆菌表达蛋白心得体会

各位大侠：
有做细菌表达的朋友吗？如果有，交流一下心得体会。先说明了，我是新小木虫，想求助点文献，可是啊，没有金币啊，也不知道发这个帖子能否为我换回点金币，也请大侠们指点一二啊，怎样获得金币！！！
言归正传，前几次做大肠杆菌表达，一个偶然，发现这么一个现象：将表达菌涂布平板后，在冰箱（4℃）放置10天后，挑克隆，接种，然后诱导，同样表达出了目的蛋白，而且表达量感觉没有下降。
大家都知道，我们原来的概念是，转化-涂布平板-挑单克隆-接种-诱导表达是一条龙下来的，原来老师给我讲的是，只能从新涂布的平板上挑克隆，否则表达量很低，或者表达失败。
这个经验也请大家试试。它最大的好处是减少了工作量，做一次转化，可以做多次表达，节省时间。

[ Last edited by amisking on 2009-11-28 at 12:05 ]

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