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fallstone

[交流] 大肠杆菌表达蛋白心得体会

各位大侠:
有做细菌表达的朋友吗?如果有,交流一下心得体会。先说明了,我是新小木虫,想求助点文献,可是啊,没有金币啊,也不知道发这个帖子能否为我换回点金币,也请大侠们指点一二啊,怎样获得金币!!!
言归正传,前几次做大肠杆菌表达,一个偶然,发现这么一个现象:将表达菌涂布平板后,在冰箱(4℃)放置10天后,挑克隆,接种,然后诱导,同样表达出了目的蛋白,而且表达量感觉没有下降。
大家都知道,我们原来的概念是,转化-涂布平板-挑单克隆-接种-诱导表达是一条龙下来的,原来老师给我讲的是,只能从新涂布的平板上挑克隆,否则表达量很低,或者表达失败。
这个经验也请大家试试。它最大的好处是减少了工作量,做一次转化,可以做多次表达,节省时间。


[ Last edited by amisking on 2009-11-28 at 12:05 ]
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lihaoexe

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我一直就是这样的啊,几个星期没问题啊,再久了拿保种的活化一下就可以了
14楼2009-10-13 12:06:37
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