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lwj19870125

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】很棘手的蛋白含量测定

做纤维素酶的固定化时用到一种pH敏感的载体,该载体含有羧基,叔氨基,酯基,固定化结束时调pH让载体沉淀,要测上清液中蛋白含量,但还有少量残留的载体,试了很多方法(考马斯亮蓝,lowry法,紫外),测出的结果比我加进去的总蛋白含量还高很多,原因可能是聚合物载体与蛋白含有类似的基团,产生了干扰,各位虫友帮我想想办法啊,做了很长时间了,蛋白测定还是没搞定
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syuchenj

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
wujin41658(金币+1,VIP+0):欢迎参加技术讨论~~~~ 9-19 22:27
双缩脲法,其干扰物特征与lowry法(folin-酚法)略有不同,可能会有差异。用你的载体试试看,干扰有多大。
还有干扰,那就痛苦了,
(1)可以采用总氨基酸定量的方法,测定原料中的总氨基酸,再测定上清中的总氨基酸。尽管这个方法实际上也不是很准,但是大概能够定量
(2)可以采用三氯醋酸沉淀法,获得沉淀后,采用凯氏定氮法,这个方法如果你的载体不是在体系中也可以沉淀的话,那么会有效的。这个是消除无机氮的常规方法。
5楼2009-09-18 19:25:03
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lwb1987521

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
抢个沙发,楼主- - 我们2个的名字怎么这么像啊。。。。
2楼2009-09-18 16:44:34
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your2007

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用二喹啉甲酸检测法(BCA法)测蛋白含量,可以考虑下
爱人者被爱,敬人者人敬
3楼2009-09-18 17:03:49
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chenyyy

新虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
帮你顶....用folin-酚法测
4楼2009-09-18 17:06:34
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