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lwj19870125

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】很棘手的蛋白含量测定

做纤维素酶的固定化时用到一种pH敏感的载体,该载体含有羧基,叔氨基,酯基,固定化结束时调pH让载体沉淀,要测上清液中蛋白含量,但还有少量残留的载体,试了很多方法(考马斯亮蓝,lowry法,紫外),测出的结果比我加进去的总蛋白含量还高很多,原因可能是聚合物载体与蛋白含有类似的基团,产生了干扰,各位虫友帮我想想办法啊,做了很长时间了,蛋白测定还是没搞定
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shijs

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议通过电泳法进行酶蛋白测定,可以根据条带比较蛋白的含量。一次可以做多个条带,比测蛋白迅速,抗干扰。

如果用测蛋白法,建议先对载体的干扰情况进行分析,同时通过另外一种方法测定载体的含量,从总蛋白中进行扣除。
W总蛋白-W载体=W酶蛋白,其中W载体应该使用其他专属方法进行测定,
10楼2009-09-20 23:57:22
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lwb1987521

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
抢个沙发,楼主- - 我们2个的名字怎么这么像啊。。。。
2楼2009-09-18 16:44:34
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your2007

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用二喹啉甲酸检测法(BCA法)测蛋白含量,可以考虑下
爱人者被爱,敬人者人敬
3楼2009-09-18 17:03:49
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chenyyy

新虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
帮你顶....用folin-酚法测
4楼2009-09-18 17:06:34
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