应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助！！！真菌RNA的提取方法
52/1返回列表
查看: 858  |  回复: 19
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)

[交流] 求助！！！真菌RNA的提取方法

我要从总的RNA里面P出相关的基因！问题是不知道选用那种方法比较好，是一株烟曲霉，现在已经把摇瓶培养48h,72h的菌体用液氮保存在-80°冰箱里，TRIZOL法，或者是异硫酸氰胍法，有哪位高手指点一下
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼2009-09-18 13:28:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caicaiyy

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我用的是Ttrizol法，效果不错。提醒你提了RNA之后要立即做反转入，不然你提的 RNA放冰箱过一两天就被降解了，CDNA可以保存很久的。
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2009-10-07 14:25:00
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 10-7 16:56
amisking(金币-3,VIP+0):其他版主已经奖励过，所以扣除！~ 10-7 16:57
菌体用液氮保存在-80℃冰箱里？这句话有点问题......到底是-80冰箱还是液氮啊~？

提取的话，可以首先用研钵将菌体在液氮中研磨成粉末，然后加TRIzol，后面的步骤都差不多，不赘述了。

建议每次都用新鲜的菌，效果会比较好。
赞一下(21人) 回复此楼
2楼2009-09-18 13:34:28
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)

谢谢！

加入液氮后放入-80°冰箱，TRIZOL法师姐说提取培养细胞中的RNA才用的
赞一下 回复此楼
3楼2009-09-18 13:40:45
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+3,VIP+0):谢谢交流 9-18 15:18
加入液氮后放-80冰箱~？呃...很有意思的保存方法。过段时间拿出来，液氮还有吗？

TRIzol用的很多啊，植物、细菌、昆虫等都可以用。不过有一个问题，对真菌来说，液氮研磨可能还不足以破坏它的细胞壁，所以可能还需要用裂解液破壁，然后再加TRIzol。

裂解液的话...你得自己找配方了。

[ Last edited by holyala on 2009-9-18 at 13:54 ]
赞一下(11人) 回复此楼
4楼2009-09-18 13:51:09
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭