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汕头大学海洋科学接受调剂
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陈思容

铜虫 (正式写手)

[交流] 求助!!!真菌RNA的提取方法

我要从总的RNA里面P出相关的基因!问题是不知道选用那种方法比较好,是一株烟曲霉,现在已经把摇瓶培养48h,72h的菌体用液氮保存在-80°冰箱里,TRIZOL法,或者是异硫酸氰胍法,有哪位高手指点一下
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+3,VIP+0):谢谢交流 9-18 15:18
加入液氮后放-80冰箱~?呃...很有意思的保存方法。过段时间拿出来,液氮还有吗?

TRIzol用的很多啊,植物、细菌、昆虫等都可以用。不过有一个问题,对真菌来说,液氮研磨可能还不足以破坏它的细胞壁,所以可能还需要用裂解液破壁,然后再加TRIzol。

裂解液的话...你得自己找配方了。

[ Last edited by holyala on 2009-9-18 at 13:54 ]
4楼2009-09-18 13:51:09
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 10-7 16:56
amisking(金币-3,VIP+0):其他版主已经奖励过,所以扣除!~ 10-7 16:57
菌体用液氮保存在-80℃冰箱里?这句话有点问题......到底是-80冰箱还是液氮啊~?

提取的话,可以首先用研钵将菌体在液氮中研磨成粉末,然后加TRIzol,后面的步骤都差不多,不赘述了。

建议每次都用新鲜的菌,效果会比较好。
2楼2009-09-18 13:34:28
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陈思容

铜虫 (正式写手)

谢谢!

加入液氮后放入-80°冰箱,TRIZOL法师姐说提取培养细胞中的RNA才用的
3楼2009-09-18 13:40:45
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陈思容

铜虫 (正式写手)

谢谢

加液氮保存的目的是为了防止反复冻融!师姐说那个Ttrizol不好用的!异硫酸氰胍法不行吗?
5楼2009-09-18 14:04:17
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