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求助,为什么PET28a双酶切过夜大孔胶检测没有条带
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用质粒pet28a做克隆载体,酶切位点是HindⅢ和XbaⅠ,和PCR片段一起双酶切过夜大孔胶电泳割胶。PCR片段跑带很清晰,pet28a什么都没有!用的是50微的体系,质粒加了15微,质粒鉴定过条带是正确的。 后来专门只做pet28a的双酶切,以为是质粒浓度不够,加大质粒的量,20微,30微都做了,过夜酶切也是没有 但是有次切了5小时左右有比较暗的带。请教高手,是什么原因?过夜酶切时间太长了?酶只切这两个点应该不会是时间的问题吧 |
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zhuifeng7000
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5楼2009-09-17 21:06:41
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4楼2009-09-17 20:28:01










但是有次切了5小时左右有比较暗的带。
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