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dongniu

木虫 (正式写手)

[求助] 小白问一个多肽纯化问题已有4人参与

请教一个多肽纯化的问题。

该多肽通过酵母细胞外表征,浓度是300 mg/L,纯度65%左右, 分子量4 kD,含有两个硫键。

现在需要纯化它,在纯化过程,需要跟另外一个合成的多肽偶联。目标要求纯度高于95%,同时HCP 小于100 ppm.

请问有什么纯化方法吗?

如果产率分别要求50%和80%的时候,需要改变什么条件?
如果纯度要求85%和95%, 需要改变什么条件?
做放大试验,纯化10克,纯化100 千克,需要改变什么条件?

多谢
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yuanbingzhan

专家顾问 (文坛精英)

祝福!
2楼2023-01-11 12:00:20
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jyngxj

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

大分子化合物的纯化需要注意,填料,上样量,流动相,检测手段,否则很难纯化

[ 发自手机版 https://muchong.com/3g ]
天然产物分离,提取,结构核磁质谱测试,结构解析,ECD测试及计算,有机化合物私人订制,有需要请联系1372218121@扣扣.com记得备注:小木虫
3楼2023-01-15 06:58:39
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Cherry-oc

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

目前多肽的纯化最常用的就是制备液相纯化,最常见的填料也就是C18硅胶,流动相一般就是TFA水/乙腈体系和醋酸水/乙腈体系。收率主要是看粗肽纯度及溶解性,粗肽杂质少,单杂没要求肯定收率就高了。至于纯度,就看是什么需求了,再摸索条件,制备液相收集了。
4楼2023-01-17 16:39:24
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Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师


【答案】应助回帖

你这个描述的比较宽泛了,所以也只能简单的回答你的问题。
根据你描述,一般来说可以将你的发酵液进行HPLC制备,从而获得你想要的纯度的产品。
至于你说的你的产品需要跟另一个产品进行偶联,这个就不好说,因为产品不一样,偶联的条件也不同的,需要具体问题具体分析。
最后关于你要求的不同纯度的产品以及从10g级别放大到100kg级别这个问题一般来说只需要改变设备的规模大小就能达到。
5楼2023-03-16 15:10:51
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zjutwwt

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

问的的确比较小白,
这种多肽不是反相就是离子交换纯化
收率难道不是越高越好吗
纯度要求看你的纯化优化情况
10g,100kg纯化设备进行放大
6楼2023-03-24 08:50:26
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