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dongniu

木虫 (正式写手)

[求助] 小白问一个多肽纯化问题已有4人参与

请教一个多肽纯化的问题。

该多肽通过酵母细胞外表征,浓度是300 mg/L,纯度65%左右, 分子量4 kD,含有两个硫键。

现在需要纯化它,在纯化过程,需要跟另外一个合成的多肽偶联。目标要求纯度高于95%,同时HCP 小于100 ppm.

请问有什么纯化方法吗?

如果产率分别要求50%和80%的时候,需要改变什么条件?
如果纯度要求85%和95%, 需要改变什么条件?
做放大试验,纯化10克,纯化100 千克,需要改变什么条件?

多谢
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Cherry-oc

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

目前多肽的纯化最常用的就是制备液相纯化,最常见的填料也就是C18硅胶,流动相一般就是TFA水/乙腈体系和醋酸水/乙腈体系。收率主要是看粗肽纯度及溶解性,粗肽杂质少,单杂没要求肯定收率就高了。至于纯度,就看是什么需求了,再摸索条件,制备液相收集了。
4楼2023-01-17 16:39:24
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