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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » 小白问一个多肽纯化问题
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dongniu

木虫 (正式写手)

[求助] 小白问一个多肽纯化问题 已有4人参与

请教一个多肽纯化的问题。

该多肽通过酵母细胞外表征，浓度是300 mg/L，纯度65%左右， 分子量4 kD,含有两个硫键。

现在需要纯化它，在纯化过程，需要跟另外一个合成的多肽偶联。目标要求纯度高于95%，同时HCP 小于100 ppm.

请问有什么纯化方法吗？

如果产率分别要求50%和80%的时候，需要改变什么条件？
如果纯度要求85%和95%， 需要改变什么条件？
做放大试验，纯化10克，纯化100 千克，需要改变什么条件？

多谢
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1楼 2023-01-10 20:12:55
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yuanbingzhan

专家顾问 (文坛精英)
摸索制备存化条件。

发自小木虫Android客户端
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祝福！
2楼2023-01-11 12:00:20
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jyngxj

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

大分子化合物的纯化需要注意，填料，上样量，流动相，检测手段，否则很难纯化

[ 发自手机版 https://muchong.com/3g ]
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3楼2023-01-15 06:58:39
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Cherry-oc

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

目前多肽的纯化最常用的就是制备液相纯化，最常见的填料也就是C18硅胶，流动相一般就是TFA水/乙腈体系和醋酸水/乙腈体系。收率主要是看粗肽纯度及溶解性，粗肽杂质少，单杂没要求肯定收率就高了。至于纯度，就看是什么需求了，再摸索条件，制备液相收集了。
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4楼2023-01-17 16:39:24
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Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师

【答案】应助回帖

你这个描述的比较宽泛了，所以也只能简单的回答你的问题。
根据你描述，一般来说可以将你的发酵液进行HPLC制备，从而获得你想要的纯度的产品。
至于你说的你的产品需要跟另一个产品进行偶联，这个就不好说，因为产品不一样，偶联的条件也不同的，需要具体问题具体分析。
最后关于你要求的不同纯度的产品以及从10g级别放大到100kg级别这个问题一般来说只需要改变设备的规模大小就能达到。
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5楼2023-03-16 15:10:51
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zjutwwt

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

问的的确比较小白，
这种多肽不是反相就是离子交换纯化
收率难道不是越高越好吗
纯度要求看你的纯化优化情况
10g，100kg纯化设备进行放大
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6楼2023-03-24 08:50:26
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