应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 插入EGFP片段不发荧光
51/1返回列表
查看: 1142  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者X似水流年X将赠送您 40 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

X似水流年X

新虫 (小有名气)

[求助] 插入EGFP片段不发荧光 已有1人参与

请问我将EGFP片段替换掉细菌一个基因的终止密码子，构建成融合蛋白，想观察它的荧光情况，可是根本看不见荧光怎么办，我已经筛选出插入成功的了，而且提取总rna验证EGFP片段已经插入进去，可是就是不发荧光，是因为融合蛋白阻碍发光吗

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2022-12-30 20:30:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hutil1543

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有可能是蛋白可溶性被破坏了，不可溶的情况下会出现没有荧光的情况。
赞一下 回复此楼
8楼2023-02-02 10:17:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

biosci

捐助贵宾 (职业作家)
你可能没有构建好吧，获得的是单交换突变体

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2022-12-31 22:43:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

X似水流年X

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2022-12-31 22:43:42
你可能没有构建好吧，获得的是单交换突变体

你好，是这样我已经通过蔗糖第二次筛选，然后验证的时候是单条带，和我构建质粒上的片段长度一致，请问是我这种插入方法有问题吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2023-01-04 22:12:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)
是不是插入位点的问题

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2023-01-05 20:49:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[教师之家] 焦虑 +5 水冰月月野兔 2026-03-13 7/350 2026-03-14 15:14 by 农药害害
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 083000环境科学与工程调剂 +6 加油呀fxy 2026-03-07 7/350 2026-03-14 05:18 by JourneyLucky
[考研] 0857求调剂 +3 axibli 2026-03-07 3/150 2026-03-14 05:09 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +3 。。陈 2026-03-08 3/150 2026-03-14 04:50 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工309分求调剂 +6 ZyZy…… 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:38 by JourneyLucky
[考研] 一志愿湖师大化学289求调剂 +6 XMCMM3.14159 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:28 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中科院，化学方向，295求调剂 +4 一氧二氮 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:35 by JourneyLucky
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 285求调剂 +4 ytter 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:48 by jxchenghu
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 一志愿华中师范071000，325求调剂 +5 RuitingC 2026-03-12 5/250 2026-03-13 10:43 by hyswxzs
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考研] 0857 资源与环境 285分 +6 未名考生 2026-03-09 6/300 2026-03-11 21:08 by 30660438
[考研] 0857环境调剂 +5 熠熠_11 2026-03-10 5/250 2026-03-11 10:59 by wang_dand
[考研] 哈工大材料324求调剂 +6 闫旭东 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:49 by 星空星月
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭