应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 插入EGFP片段不发荧光
81/1返回列表
查看: 1295  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者X似水流年X将赠送您 40 个金币

X似水流年X

新虫 (小有名气)

[求助] 插入EGFP片段不发荧光 已有1人参与

请问我将EGFP片段替换掉细菌一个基因的终止密码子，构建成融合蛋白，想观察它的荧光情况，可是根本看不见荧光怎么办，我已经筛选出插入成功的了，而且提取总rna验证EGFP片段已经插入进去，可是就是不发荧光，是因为融合蛋白阻碍发光吗

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2022-12-30 20:30:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)
你可能没有构建好吧，获得的是单交换突变体

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2022-12-31 22:43:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

X似水流年X

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2022-12-31 22:43:42
你可能没有构建好吧，获得的是单交换突变体

你好，是这样我已经通过蔗糖第二次筛选，然后验证的时候是单条带，和我构建质粒上的片段长度一致，请问是我这种插入方法有问题吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2023-01-04 22:12:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)
是不是插入位点的问题

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2023-01-05 20:49:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

X似水流年X

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by biosci at 2023-01-05 20:49:43
是不是插入位点的问题

可能是的，我再换个位置

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2023-01-06 14:46:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)
建议看看文献，多选几个整合位点

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2023-01-10 22:24:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

X似水流年X

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by biosci at 2023-01-10 22:24:08
建议看看文献，多选几个整合位点

好的，非常感谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼
7楼2023-01-11 00:54:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hutil1543

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有可能是蛋白可溶性被破坏了，不可溶的情况下会出现没有荧光的情况。
赞一下 回复此楼
8楼2023-02-02 10:17:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 X似水流年X 的主题更新
81/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭