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Zehs

新虫 (小有名气)

[求助] 细菌16srDNAPCR 已有2人参与

我提完了细菌的DNA后想给细菌鉴定一下但是16sPCR死活没法PCR出来,其中一次如下图所示,想咨询一下各位实验大佬,可能出现了什么原因,感激涕零(跑过温度梯度,引物序列参照实验室之前师姐设计的)。
链接: https://pan.baidu.com/s/1_EvpAVe6Yhq1iwnNTGLtZQ?pwd=4c7d 提取码: 4c7d
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rosesea1989

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

链接打不开 但是细菌的16s很好跑出来的 通用引物就可以
我是学泡一碰就碎
2楼2023-01-09 15:46:38
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Endotoxin

金虫 (著名写手)

没法看你的引物序列,是不是酶用的高保真的呀?像16s的引物一般都使用简并引物,最好用普通taq酶扩增,不要用高保真酶。

发自小木虫IOS客户端
3楼2023-01-20 12:39:53
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hutil1543

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1.你是提取环境DNA还是特定菌株DNA,如果是环境中的DNA注意纯化,如果是特定菌株DNA考虑使用其他引物而不是通用引物,通用引物在不少微生物中比如bacillus中效果不好。
4楼2023-02-02 10:13:28
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