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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 细菌16srDNAPCR
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【悬赏金币】回答本帖问题，作者Zehs将赠送您 30 个金币

Zehs

新虫 (小有名气)

[求助] 细菌16srDNAPCR 已有2人参与

我提完了细菌的DNA后想给细菌鉴定一下但是16sPCR死活没法PCR出来，其中一次如下图所示，想咨询一下各位实验大佬，可能出现了什么原因，感激涕零（跑过温度梯度，引物序列参照实验室之前师姐设计的）。
链接: https://pan.baidu.com/s/1_EvpAVe6Yhq1iwnNTGLtZQ?pwd=4c7d 提取码: 4c7d
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1楼 2022-12-13 20:38:37
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rosesea1989

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

链接打不开 但是细菌的16s很好跑出来的 通用引物就可以
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我是学泡一碰就碎
2楼2023-01-09 15:46:38
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Endotoxin

金虫 (著名写手)
没法看你的引物序列，是不是酶用的高保真的呀？像16s的引物一般都使用简并引物，最好用普通taq酶扩增，不要用高保真酶。

发自小木虫IOS客户端
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3楼2023-01-20 12:39:53
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hutil1543

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1.你是提取环境DNA还是特定菌株DNA，如果是环境中的DNA注意纯化，如果是特定菌株DNA考虑使用其他引物而不是通用引物，通用引物在不少微生物中比如bacillus中效果不好。
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4楼2023-02-02 10:13:28
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