24小时热门版块排行榜    

查看: 1146  |  回复: 6
【悬赏金币】回答本帖问题,作者Mr_K°将赠送您 5 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Mr_K°

新虫 (初入文坛)

[求助] WB实验蛋白印迹形态非常不规则

大家好。本人快开题了,最近在做WB检测内源性蛋白的时候,使用15%蛋白胶,半干转PVDF膜,5%脱脂乳封闭1小时,一抗孵育1小时,2抗孵育1小时,之间均使用TBST洗3次,每次10分钟。显影的时候,条带非常奇怪。请问大家是否遇到过这个现象,希望多给我建议和意见。谢谢。

WB实验蛋白印迹形态非常不规则


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr_K°

新虫 (初入文坛)

使用的胶是一步法制胶试剂盒。120V电压全程电泳。

发自小木虫Android客户端
3楼2022-11-14 15:59:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

NatureBios

金虫 (正式写手)

这个就是蛋白量大了,往下跑的时候,左右扩散导致了蛋白牵手现象,可以降低蛋白上样量,用15的分离胶那是小分子量,电压可以低一点往下跑,凝胶凝固时间延长一些

发自小木虫Android客户端
免疫学实验技术,杭州荟丹(NatureBiosciences)(科研抗体试剂)技术支持
2楼2022-11-14 15:58:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr_K°

新虫 (初入文坛)

目的蛋白大概10kDa。蛋白电泳每孔约25微克总蛋白。

发自小木虫Android客户端
4楼2022-11-14 16:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr_K°

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by NatureBios at 2022-11-14 15:58:33
这个就是蛋白量大了,往下跑的时候,左右扩散导致了蛋白牵手现象,可以降低蛋白上样量,用15的分离胶那是小分子量,电压可以低一点往下跑,凝胶凝固时间延长一些

感谢您的帮助,本次检测的蛋白大概10kDa。我今晚减少上样量试试。谢谢!

发自小木虫Android客户端
5楼2022-11-14 16:07:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +6 mysdl 2026-03-11 8/400 2026-03-12 17:19 by 松花缸1201
[考研] 288求调剂085600材料与化工 +14 Daunrin 2026-03-07 16/800 2026-03-12 16:19 by songkelly
[考研] 材料301分求调剂 +4 Liyouyumairs 2026-03-12 4/200 2026-03-12 15:46 by peike
[考研] 化工学硕306求调剂 +7 42838695 2026-03-12 7/350 2026-03-12 11:21 by 2020015
[考研] 材料工程,326分,求调剂 +5 KRSLSR 2026-03-10 5/250 2026-03-11 21:07 by kiokin
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +9 我想读研11 2026-03-10 9/450 2026-03-11 16:42 by 看开一点
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +3 在家想你 2026-03-11 3/150 2026-03-11 08:13 by ms629
[考研] 279求调剂 +3 莫xiao 2026-03-10 4/200 2026-03-11 08:06 by 斩魂滴兔子!
[考研] 哈工大材料324求调剂 +6 闫旭东 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:49 by 星空星月
[考研] 材料与化工求调剂 +11 与冬清宁 2026-03-07 14/700 2026-03-10 14:23 by Linda Hu
[考研] 0817一志愿苏州大学280复试调剂 +9 kk扛 2026-03-07 9/450 2026-03-10 14:20 by peike
[考博] 求材料读博院校 +9 yanglei131 2026-03-08 9/450 2026-03-10 11:54 by 天道酬勤2026686
[考研] 310 070300化学求调剂 +4 扑风铃的猫 2026-03-08 5/250 2026-03-09 19:46 by 30660438
[考研] 320求调剂 +4 魏zy 2026-03-08 4/200 2026-03-09 16:14 by ruiyingmiao
[考研] 070300化学求调剂 +5 扑风铃的猫 2026-03-08 10/500 2026-03-09 13:58 by macy2011
[考研] 296求调剂 +4 Xinyu Wu311 2026-03-09 4/200 2026-03-09 11:51 by 勇敢太监王公公
[考研] 337求调剂 +3 睡醒,。 2026-03-09 3/150 2026-03-09 10:02 by 求调剂zz
[考研] 材料化工求调剂 +7 博斯特525 2026-03-06 8/400 2026-03-08 03:51 by lfhuang
[考研] 276求调剂 本科天津工业大学 一志愿北京化工大学0855 +4 路lyh123 2026-03-06 6/300 2026-03-07 11:37 by shdliugang
[考研] 材料与化工354调剂 +4 Lucy-xiao 2026-03-06 7/350 2026-03-06 09:57 by hxuq8429
信息提示
请填处理意见