24小时热门版块排行榜    

查看: 507  |  回复: 7
当前主题已经存档。

小瞥

铁虫 (小有名气)

[交流] 抗性对转化的影响

在做完点突变的PCR后,用Dpn1酶切,用TOP10做感受态细胞,转化后涂于Kana的培养基上, 始终长不出来。以前做氨苄抗性的都没有问题,但卡那抗性的怎么也做不出来,请问各位大侠是什么原因?小妹不胜感激
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这种突变的方法我也用过,Dpn I处理后直接转化,很难长出来,你可以纯化一下,然后再转化。
一个人可以不成功,但不可以不成长!
2楼2009-09-14 16:08:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你确定你的质粒是卡那抗性的?会不会是卡那浓度太高了?
3楼2009-09-14 19:15:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小瞥

铁虫 (小有名气)

是卡那抗性的,是标准的100ng/ml,没错的。我们才配的。还有,已经纯化过了,也不行。
4楼2009-09-16 10:38:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小瞥

铁虫 (小有名气)

是卡那抗性的,是标准的100ng/ml,没错的。我们才配的。还有,已经纯化过了,也不行。
5楼2009-09-16 10:49:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

银杏下

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你以前做的Amp抗性和现在的kana抗性我想主要是载体不同吧,载体不同点不仅仅在于抗性,有可能载体大小的影响等等,或者两次实验其他的条件也不同,比如感受态、连接步骤等等。
6楼2009-09-16 12:56:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

菊花茶

木虫 (著名写手)

换个载体试试
7楼2009-09-16 14:35:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guotieying

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是载体的抗性不同?
本来无一物,何处惹尘埃。
8楼2009-09-16 15:04:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小瞥 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +3 17501029541 2026-03-23 4/200 2026-03-23 23:47 by Txy@872106
[考研] 081700 调剂 267分 +7 迷人的哈哈 2026-03-23 7/350 2026-03-23 23:19 by 星空星月
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +5 葵梓卫队 2026-03-18 7/350 2026-03-23 16:26 by lingjue
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考! +4 lemonzzn 2026-03-17 8/400 2026-03-21 22:49 by lemonzzn
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 考研调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 0805 316求调剂 +3 大雪深藏 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:55 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300(化学)304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
信息提示
请填处理意见