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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗性对转化的影响
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小瞥

铁虫 (小有名气)

[交流] 抗性对转化的影响

在做完点突变的PCR后，用Dpn1酶切，用TOP10做感受态细胞，转化后涂于Kana的培养基上， 始终长不出来。以前做氨苄抗性的都没有问题，但卡那抗性的怎么也做不出来，请问各位大侠是什么原因？小妹不胜感激
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1楼 2009-09-14 15:55:14
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小瞥

铁虫 (小有名气)
是卡那抗性的，是标准的100ng/ml,没错的。我们才配的。还有，已经纯化过了，也不行。
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5楼2009-09-16 10:49:15
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这种突变的方法我也用过，Dpn I处理后直接转化，很难长出来，你可以纯化一下，然后再转化。
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一个人可以不成功，但不可以不成长！
2楼2009-09-14 16:08:01
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你确定你的质粒是卡那抗性的？会不会是卡那浓度太高了？
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3楼2009-09-14 19:15:18
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小瞥

铁虫 (小有名气)
是卡那抗性的，是标准的100ng/ml,没错的。我们才配的。还有，已经纯化过了，也不行。
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4楼2009-09-16 10:38:00
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