| 查看: 560 | 回复: 5 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
xihanlianz银虫 (正式写手)
|
[交流]
为什么ISSR引物PCR扩增后条带少
|
||
|
请教大家，以下是我用ISSR引物扩增DNA的实验。实验目的是用温度梯度筛选最佳退火温度。生工给的Tm是53.18.图中第五条是Marker，除此之外，从1到10泳道的温度分别为45.5，46.3，47.7，49.4，51.4，53.3，55.3，57.6，59.2. 我用的反应体系是2ulDNA， 1.5mM MgCl2，0.2mMdNTPs，0.15uM primer，1U Taq。循环参数:94度，7分，（94度 30秒，45度开始的温度梯度，45秒， 72度 3分）35个循环。最后72度，7分钟 跑出条带的退火温度比Tm值高，但是又只有三条条带，条带数太少了。看文献中普遍能有十几条，少点可能6，7条。请大家帮忙分析下原因，请高手指教该如何去优化实验方案？ [ Last edited by amisking on 2009-9-13 at 18:30 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
300求调剂，材料科学英一数二
已经有5人回复
-
招08考数学
已经有15人回复
-
0854电子信息求调剂
已经有4人回复
-
08工学调剂
已经有14人回复
-
材料292调剂
已经有7人回复
-
085602 289分求调剂
已经有4人回复
-
289求调剂
已经有3人回复
-
材料专硕331求调剂
已经有4人回复
-
0703化学调剂，求导师收
已经有5人回复
-
申博26年
已经有4人回复
xihanlianz
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 531.7
- 散金: 52
- 红花: 1
- 帖子: 575
- 在线: 103.5小时
- 虫号: 628069
- 注册: 2008-10-16
- 性别: MM
- 专业: 植物学
2楼2009-09-13 18:09:00
xihanlianz
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 531.7
- 散金: 52
- 红花: 1
- 帖子: 575
- 在线: 103.5小时
- 虫号: 628069
- 注册: 2008-10-16
- 性别: MM
- 专业: 植物学
3楼2009-09-14 08:15:59
zhangjunem
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 11044.4
- 红花: 27
- 沙发: 5
- 帖子: 3950
- 在线: 551.1小时
- 虫号: 392892
- 注册: 2007-06-05
4楼2009-09-14 09:10:48
Sarah_Shy
木虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2173.1
- 散金: 20
- 红花: 2
- 帖子: 55
- 在线: 73.5小时
- 虫号: 731594
- 注册: 2009-03-26
- 性别: MM
- 专业: 微生物资源与分类学
5楼2009-09-14 10:00:36
xihanlianz
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 531.7
- 散金: 52
- 红花: 1
- 帖子: 575
- 在线: 103.5小时
- 虫号: 628069
- 注册: 2008-10-16
- 性别: MM
- 专业: 植物学
6楼2009-09-14 16:22:44
