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铜虫 (小有名气)

[交流] 病理切片不易,绝世刀法需要慢慢练,但该避的坑你不能不懂!

病理实验看似简单,实际上稍不注意细节就漏洞百出,不同组织如何保存?不同切片有何区别?绝世刀法需要慢慢练,但该避的坑你不能不懂!今天小助手汇总了粉丝私信过我们的那些关于病理切片的问题,关注小助手,看小助手如何搞定这些实验难题。



小助手,组织如何保存?



普通病理用固定液(多聚甲醛)保存;免疫组化、免疫荧光实验不宜固定时间太久。



小助手,不同组织都用一个脱水流程吗?





不同组织,其结构不同,脱水流程也有是区别的



小助手,石蜡包埋切片一般切的厚度是多少?冰冻切片切多厚?



石蜡切片厚度为3-10um;冰切厚度为4-5um。



小助手,冰切出现裂痕的原因?



可能是防卷板没放好,冷冻切片机的温度一般是零下10到15℃;还有可能是你的组织比较硬或者是刀片的问题,不同组织切片机里也要不同温度需要注意一下。



石蜡切片老是卷片是为什么?



蜡块不够冰或者冰过头了;切片刀不锋利





为什么切片总是脱片?



1)粘附剂因素在制作组织学和病理学石蜡切片时,一般用甘油蛋白做粘附剂,但若甘油蛋白配制的时间过长,蛋白质变性,甘油蛋白的粘附作用即降低,可导致组织切片与载玻片粘附不牢,切片一进入二甲苯溶液即从玻片上脱落下来。

2)温度的影响常规石蜡切片染色,温度一般在20-37较好。组织从二甲苯脱蜡出来,立即进入室温的纯酒精清洗,这样组织一下从37降至4℃左右,一冷一热,热胀冷缩,造成组织容易从载玻片上脱落下来。

3)浸蜡时间的影响,组织取材后在脱水,浸蜡时间和包埋温度上掌握不够准确,特别是腺体组织比较娇嫩,稍有过头组织就变脆,在染色过程中就极易出现脱片现象。



脑组织切片有空洞产生是什么原因?



1)组织原因

2)固定不充分

3)病变

4)摊片温度过高



石蜡切片总是弯带是为什么?



1)蜡块上下两边或左右两边不平行

2)蜡块与切片刀刀口不平行

3)切片刀锋利程度不一致4)组织不平整



硬组织切片怎么切,需要注意什么?



1)包埋时要抽真空,常温静置

2)硬塑包埋,用金刚石刀片切片,注意厚度(20um),注意切片的平整度



石蜡切片总是切的厚怎么办?



1)切片机微调失灵,齿轮跳格

2)切片机上的组织夹持器未拧紧,刀片角度太大或太小

3)蜡块太大、太硬
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