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心梗、心肌缺血再灌注相关药效实验整体解决方案
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心梗、心肌缺血再灌注相关药效实验整体解决方案 一、模型种类： 1、大、小鼠、急性心肌缺血模型； 2、大、小鼠、心肌缺血再灌注 二、心梗（MI）模型制备方法： 1、实验动物： SD大鼠 ，雄性， 体重：180-200g 周龄：6-7周 动物等级：SPF级 2、手术方法： 动物深度麻醉，确认麻醉状态后，备皮，安装好心电监护仪，消毒局部皮肤，铺洞巾后剪开肋间皮肤，钝性分离肌肉、打开心包膜，将心脏推出体外，暴露左冠状动脉前降支，用6-0无菌丝线快速结扎，打活结，看到心脏底部变白，用荷包缝法迅速关闭胸腔，挤压防止气胸，造成左室前壁心肌缺血。分别记录术前、缺血时心电图变化。 三、心肌缺血再灌注（I/R）模型制备方法： 1、实验动物：SD大鼠 ，雄性，体重：180-200g，周龄：6-7周，动物等级：SPF级 2、手术方法： 动物深度麻醉，确认麻醉状态后，备皮，安装好心电监护仪，消毒局部皮肤，铺洞巾后剪开肋间皮肤，钝性分离肌肉、打开心包膜，将心脏推出体外，暴露左冠状动脉前降支，用6-0无菌丝线快速结扎，打活结，看到心脏底部变白，用荷包缝法迅速关闭胸腔，挤压防止气胸，造成左室前壁心肌缺血。分别记录术前、缺血时心电图变化。 到达缺血时间以后，打开胸腔，解开活结，再次关闭胸腔，缝合肌肉皮肤，进行心肺复苏。分别记录术前、缺血时和再灌注后的心电图变化。造模成功后进行药物治疗，术后观察动物活动、采食情况。处死前对实验动物采血。术后进行心肌组织取样、TTC-Evans blue染色，进行心梗面积计算。 四、手术后护理及观察： a术后护理：术后单笼饲养，常规饲料及饮水。 b观察：每天观察动物死亡或濒死情况、精神状态、行为活动、进食等。 c伤口局部观察：术后每天1次，观察伤口有无红肿发炎等。 d体重称量记录：术后2次/周，称重并记录体重变化情况。 五、治疗及评价： 1、心肌内多点注射 2、灌胃、腹腔、尾静脉等多途径给药 、大小鼠眼底静脉丛、大动物静脉采血 3、实时心电监护，输出心电图 4、动物心脏超声及数据分析 5、Micro-CT、小动物核磁成像 6、心脏TTC染色 7、心脏病理切片，HE、masson，天狼猩红染色 8、病理读片，分析梗死面积、胶原百分比 9、免疫组化、免疫荧光、凋亡（Tunel） 10、透射电镜、扫描电镜分析。 11、WB、QPCR 心梗相关血清指标检测（CK-MB等） 特点： 1、制备过程技术娴熟，最大限度的保证入组动物梗死程度均一。 2、不存在因气管切开而引起的窒息死亡。 3、创伤小，恢复快，最大限度减少人为因素对实验结果的干扰。 |
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