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酶切完连接构建载体一直不成功
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切入DNA片段1385bp，载体4729bp 跑胶看亮度，片段大概10ng/ul，载体大概40ng/ul 片段加了15ul，载体2ul，buffer2ul，T4连接酶1ul，摩尔比大概1:6.5。 为什么一直连接不上呢？amp板上一个单克隆都没有 卡在这个实验已经一个月多了真的头秃了！ 求帮助！ @youlinglyw @biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan 发自小木虫IOS客户端 |
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2楼2022-08-07 14:16:39
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3楼2022-08-07 15:13:27
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昨天又做了两板，载体53.2ng/ul，片段15.7ng/ul，仪器测得浓度，OD260/280都有1.8。1:3比例做了10体系，1:7做了20体系，都没有长单克隆，我真的好迷茫啊，到底问题出在哪里了 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2022-08-10 09:37:02
5楼2022-08-10 17:39:42
6楼2022-08-10 20:54:54
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7楼2022-08-16 23:30:13