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酶切完连接构建载体一直不成功
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切入DNA片段1385bp,载体4729bp 跑胶看亮度,片段大概10ng/ul,载体大概40ng/ul 片段加了15ul,载体2ul,buffer2ul,T4连接酶1ul,摩尔比大概1:6.5。 为什么一直连接不上呢?amp板上一个单克隆都没有 卡在这个实验已经一个月多了真的头秃了! 求帮助! @youlinglyw @biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan 发自小木虫IOS客户端 |
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2楼2022-08-07 14:16:39
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3楼2022-08-07 15:13:27
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昨天又做了两板,载体53.2ng/ul,片段15.7ng/ul,仪器测得浓度,OD260/280都有1.8。1:3比例做了10体系,1:7做了20体系,都没有长单克隆,我真的好迷茫啊,到底问题出在哪里了 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2022-08-10 09:37:02
5楼2022-08-10 17:39:42
6楼2022-08-10 20:54:54
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