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liwenfeng202银虫 (小有名气)
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【求助/交流】+ 细胞出现诡异死亡，请达人教我
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| 我的细胞（海水鱼类鳍条细胞）在传代之后24小时之内没有问题，24小时之后开始同时在多个位置出现死亡，细胞变圆，形成空斑，并且迅速蔓延，36小时左右培养瓶中有60%细胞变圆，48小时之内几乎所有细胞死亡。这个问题已经出现几周了，无论是原代，23456代都是同样的死亡，消化条件我更改过很多次了，无效，营养成分我添加的很足应该也没有问题，培养液也不变浑浊，应该不是细菌污染，真菌污染也没有观察到。现在请达人指教，有没有别的什么问题在，谢谢！ |
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liwenfeng202
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4楼2009-09-12 12:51:58
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2楼2009-09-11 12:26:34
Rubisco580
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楼主的细胞不是癌细胞，所以体外培养肯定会死。可能缺少什么生长因子之类的，我不是很清楚你的细胞的特性，所以无法定论。 其次，细胞变圆不一定是细胞死亡，楼主提到消化，那么细胞应该是贴壁的吧。贴壁细胞分裂的时候会变圆并漂起来，分裂完后会贴回去。死细胞在显微镜下看的时候是一团黑，没有折光率变化，活细胞有折光率变化。 还有，楼主用的培养瓶/培养皿会不会有问题？我在养贴壁细胞的时候见到过一些很差的培养皿/培养瓶，细胞根本不贴壁。 最后嘛，楼主有没想过是支原体污染？支原体污染可以用荧光染色法或者PCR鉴定，这些书上都有方法的。 希望楼主细胞能长好，呵呵。 [ Last edited by Rubisco580 on 2009-9-11 at 15:32 ] |
3楼2009-09-11 15:25:44
liwenfeng202
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5楼2009-09-12 13:24:01
