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liwenfeng202银虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】+ 细胞出现诡异死亡,请达人教我
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| 我的细胞(海水鱼类鳍条细胞)在传代之后24小时之内没有问题,24小时之后开始同时在多个位置出现死亡,细胞变圆,形成空斑,并且迅速蔓延,36小时左右培养瓶中有60%细胞变圆,48小时之内几乎所有细胞死亡。这个问题已经出现几周了,无论是原代,23456代都是同样的死亡,消化条件我更改过很多次了,无效,营养成分我添加的很足应该也没有问题,培养液也不变浑浊,应该不是细菌污染,真菌污染也没有观察到。现在请达人指教,有没有别的什么问题在,谢谢! |
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三磷酸腺苷
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2楼2009-09-11 12:26:34
Rubisco580
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楼主的细胞不是癌细胞,所以体外培养肯定会死。可能缺少什么生长因子之类的,我不是很清楚你的细胞的特性,所以无法定论。 其次,细胞变圆不一定是细胞死亡,楼主提到消化,那么细胞应该是贴壁的吧。贴壁细胞分裂的时候会变圆并漂起来,分裂完后会贴回去。死细胞在显微镜下看的时候是一团黑,没有折光率变化,活细胞有折光率变化。 还有,楼主用的培养瓶/培养皿会不会有问题?我在养贴壁细胞的时候见到过一些很差的培养皿/培养瓶,细胞根本不贴壁。 最后嘛,楼主有没想过是支原体污染?支原体污染可以用荧光染色法或者PCR鉴定,这些书上都有方法的。 希望楼主细胞能长好,呵呵。 [ Last edited by Rubisco580 on 2009-9-11 at 15:32 ] |
3楼2009-09-11 15:25:44
liwenfeng202
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5楼2009-09-12 13:24:01
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6楼2009-09-12 13:26:43











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