24小时热门版块排行榜    

查看: 2437  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

fbcjm

新虫 (小有名气)

[交流] 最近在做毕赤酵母蛋白诱导,总是失败,想请个好心人帮帮忙,谢谢了 已有4人参与

老师让做毕赤酵母,电转总是长不出来,有很多问题,希望有好心人可以帮帮忙。

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

abcjlm

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by fbcjm at 2022-07-18 15:13:41
没,有点绝望
...

你看了毕赤酵母表达手册了吗
6楼2022-07-19 17:19:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

biosci

捐助贵宾 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
毕赤酵母我是专家,联系我吧

发自小木虫Android客户端
2楼2022-07-09 10:38:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fbcjm

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2022-07-09 10:38:14
毕赤酵母我是专家,联系我吧

太谢谢了,我先大概说一下我的步骤吧。
我现在转的酵母是GS115,载体是Ppic9k,SacI酶切。下面是酶切跑胶对照图片。
酵母感受态的制备就是四度下水洗,山梨醇各洗三次。做了几次了,也有现做现转的,也有放在负八十保存后再转的。

电压1500,2000都试过,是艾本德的电转仪。电转后加入1ML山梨醇,30℃水浴两小时涂板。

涂的板是缺HIS板。
就是这瓶和葡萄糖加琼脂A配成的培养基。
最近在做毕赤酵母蛋白诱导,总是失败,想请个好心人帮帮忙,谢谢了


最近在做毕赤酵母蛋白诱导,总是失败,想请个好心人帮帮忙,谢谢了-1



发自小木虫Android客户端
3楼2022-07-09 16:13:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

abcjlm

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fbcjm at 2022-07-09 16:13:45
太谢谢了,我先大概说一下我的步骤吧。
我现在转的酵母是GS115,载体是Ppic9k,SacI酶切。下面是酶切跑胶对照图片。
酵母感受态的制备就是四度下水洗,山梨醇各洗三次。做了几次了,也有现做现转的,也有放在负八十 ...

现在弄好了吗
4楼2022-07-15 15:29:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 11/550 2026-08-13 22:57 by 启萌科技
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +9 Tide man 2026-08-10 10/500 2026-08-13 20:33 by 温淼淼淼
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见