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吉田bio铜虫 (小有名气)
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佐剂性类风湿关节炎动物模型
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佐剂性类风湿关节炎动物模型 【造模机制】弗氏佐剂(Freund adjuvant,FA)是用矿物油(液状石蜡）、乳化剂(羊毛脂)和灭活的分枝杆菌（结核分枝杆菌或卡介苗）组成的油包水乳化佐剂。完全具有这三种成分的佐剂称为弗氏完全佐剂(complete Freund adjuvant,CFA)；不含分枝杆菌的佐剂为弗氏不完全佐剂(incomplete Freund's adjuvant,IFA)。在动物皮下组织注射弗氏佐剂后，弗氏佐剂内的液状石蜡不能代谢而存留在注射部位起到抗原储存作用，使抗原缓慢持续地释放，不断刺激机体的免疫系统而产生免疫反应；羊毛脂可使水溶性抗原与油稳定地乳化；分枝杆菌具有很强的免疫刺激作用，可以非特异性地激活免疫系统。有报道CFA中结核杆菌蛋白分子与关节滑膜上的某些糖蛋白分子结构相似，可诱导大鼠产生自身抗原或结核杆菌与鼠组织的复合物，被T淋巴细胞识别，诱发针对关节的继发性自身免疫反应。 【造模方法】弗氏完全佐剂的配置方法是液状石蜡和无水羊毛脂按 6：4(V/V)(夏天使用）或2：1(冬天使用）的比例混合,高压消毒后,按 5mg/ml加入 80℃灭活1小时的减毒卡介苗或干燥结核死菌制成，4℃保存备用。不加卡介苗或结核死菌的为IFA。目前弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂均已有成品市售。 选用体重 150~200g的大鼠。用乙醚将动物浅麻醉，用0.1ml弗氏完全佐剂皮内注射于大鼠尾根部皮下或后肢足垫内即可。1周后出现类风湿性关节炎病理改变。 【模型特点】接种后 3～4天注射局部肿胀并达到高峰，然后逐渐减轻,约在第 8天后再度肿胀并逐渐加重。因迟发性超敏反应，接种后第10~18天另一侧后肢足垫肿胀，第18~25天形成多发性关节炎。接种4 周光镜下可见关节滑膜组织中有中性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞漫润，关节腔内有纤维蛋白、多形核白细胞和单核细胞渗出，出现滑膜组织炎性增生，血管翳形成并伸向关节软骨表面，关节软骨破坏。 【应用范围】本模型可引起明显的细胞免疫功能异常，与人类类风湿性关节炎发病过程类似。多用于类风湿性关节炎病理过程和实验性治疗研究。 【注意事项】①制备弗氏完全佐剂时应将分枝杆菌充分研碎，以提高模型的成功率；②年幼（<21日龄）或年长（>9个月龄）的大鼠均不易诱导佐剂性关节炎。 【模型评价】本模型是常用的经典研究实验模型，但这一模型可受到细菌和佐剂成分比率的干扰，病变程度个体差异较大，而影响实验的进程和实验结果。有报道将卡介苗浓度提高至 20mg/ml的CFA O.1ml注射至大鼠后胶足跖皮内能明显提高成功率,较以往报道的含10mg/ml卡介苗浓度的CFA 0.05ml 注射量、背部多点注射法等有较大的改进。 |
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