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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 求助， 载体双酶切胶回收不出来，重复很多次了，不知道怎么办了
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酸奶包

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助， 载体双酶切胶回收不出来，重复很多次了，不知道怎么办了 已有3人参与

两个载体双酶切，有个长点的载体双酶切之后胶回收跑电泳总是跑不出来条带，其他都正常有条带，不知道怎么回事
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1楼 2022-06-29 11:57:29
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回帖置顶 ( 共有1个 )

酸奶包

铁虫 (初入文坛)
酸奶包: 回帖置顶 2022-06-29 21:20:06
重新提了质粒，不敢轻易酶切胶回收了，找不到原因，感觉还是会失败

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9楼2022-06-29 21:17:31
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

2012csc

至尊木虫 (知名作家)
胶回收效率很低，不代表没有。

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坚持就是胜利！
3楼2022-06-29 12:10:43
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2012csc

至尊木虫 (知名作家)
可能原因很多，不切或单切跑电泳正常？

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坚持就是胜利！
2楼2022-06-29 12:08:55
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2012csc

至尊木虫 (知名作家)
要是构建载体没必要胶回收后再跑电泳。

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坚持就是胜利！
4楼2022-06-29 12:12:06
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030Selma

金虫 (正式写手)
试试直接纯化？

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5楼2022-06-29 12:53:03
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酸奶包

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 2012csc at 2022-06-29 12:08:55
可能原因很多，不切或单切跑电泳正常？

不切的质粒跑电泳是正常的，酶切后也跑电泳有条带

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6楼2022-06-29 21:05:45
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酸奶包

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 2012csc at 2022-06-29 12:10:43
胶回收效率很低，不代表没有。

测浓度很低，几ng／ul

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7楼2022-06-29 21:07:48
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酸奶包

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 030Selma at 2022-06-29 12:53:03
试试直接纯化？

酶切结束直接纯化？不用跑电泳看看切哪条带吗？

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8楼2022-06-29 21:09:40
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2012csc

至尊木虫 (知名作家)
后面是要做什么实验？酶切电泳胶回收完 为什么还要电泳？一定要把核酸搞没？

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坚持就是胜利！
10楼2022-06-29 21:31:47
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