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请教PCR体系问题
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以前做过PCR，但都是师兄师姐给的一个体系，就是dNTP加多少，Taq酶加多少，模板加多少，引物加多少等的，加多少量都给弄好了，但是做了几个不同的基因的PCR后，每次加的量有时是一样的，像有次可能是Taq酶加1.5μL，但是下次可能就是1μL了。这个体系是怎么来的啊，就是加多少的量，很迷茫 。请明白的虫友给讲讲，谢谢了 |
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yxx41
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我做的时候是根据标准体系然后根据PCR结果有针对性的慢慢做改变，一直到扩增产物达到预期标准。 模板：10^4 -- 10^6 copies 引物：0.1-0.5pM/each Mg离子：1-3mM dNTP:200uM/each Taq酶：1-4U/100uL 总体系为100uL。 更具体的可以参阅一些文献和书籍，wikipedia之类的啊。 [ Last edited by yxx41 on 2009-9-9 at 22:32 ] |
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