| 查看: 1183 | 回复: 10 | ||
| 当前主题已经存档。 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[交流]
请教PCR体系问题
|
||
以前做过PCR，但都是师兄师姐给的一个体系，就是dNTP加多少，Taq酶加多少，模板加多少，引物加多少等的，加多少量都给弄好了，但是做了几个不同的基因的PCR后，每次加的量有时是一样的，像有次可能是Taq酶加1.5μL，但是下次可能就是1μL了。这个体系是怎么来的啊，就是加多少的量，很迷茫 。请明白的虫友给讲讲，谢谢了 |
回复此楼
7楼2009-09-11 15:16:36
2楼2009-09-09 21:13:20
weilin2378
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 4737.1
- 散金: 3
- 帖子: 163
- 在线: 210.8小时
- 虫号: 792276
- 注册: 2009-06-11
- 性别: GG
- 专业: 生物地质学
3楼2009-09-09 22:17:31
yxx41
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 880.5
- 散金: 10
- 帖子: 289
- 在线: 19.9小时
- 虫号: 642062
- 注册: 2008-10-31
- 专业: 微生物资源与分类学
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
生命核心(金币+0,VIP+0):欢迎交流 9-9 22:33
生命核心(金币+1,VIP+0):欢迎交流 9-9 22:56
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
生命核心(金币+0,VIP+0):欢迎交流 9-9 22:33
生命核心(金币+1,VIP+0):欢迎交流 9-9 22:56
|
我做的时候是根据标准体系然后根据PCR结果有针对性的慢慢做改变，一直到扩增产物达到预期标准。 模板：10^4 -- 10^6 copies 引物：0.1-0.5pM/each Mg离子：1-3mM dNTP:200uM/each Taq酶：1-4U/100uL 总体系为100uL。 更具体的可以参阅一些文献和书籍，wikipedia之类的啊。 [ Last edited by yxx41 on 2009-9-9 at 22:32 ] |
4楼2009-09-09 22:30:40
20