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色谱柱清洗问题 已有7人参与
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请问一下，色谱柱在用甲醇清洗的时候。第一天是60bar，第二天是63.7bar，过几天达到了67bar，这压力变化有点大，是不是考虑柱子没洗干净，因为是买的新柱子，所以想问一下怎么清洗柱子。我所用的流动相是磷酸二氢钾的盐溶液，ph2.4左右。每天的清洗程序为100%的水（20min）80%的水（10min）60%的水（10min）40%的水（10min）20%的水（10min）到100%的甲醇（20min） @wyy080214 发自小木虫IOS客户端 |
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【答案】应助回帖
| 目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质，硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一定浓度有机溶剂的流动相中要大得多，所以长时间的用纯水冲冼会导致固定相的流失，引起柱效 下降。 对于常规的院基键合柱而言，由于烷基长链与水是不互溶的，烷基长链之间的相互作用 力大于烷基与水分子的作用力，使得烷基长链之间相互靠近，长时间水流的冲刷导致相互连结的烷基长链倒伏在硅胶基质的表面，对疏水性物质的保留能力下降，即相塌陷。 所以，一般不能用纯水冲洗院基键合的反相色谱柱。 越来越多的强极性化合物要求高比例的水相进行分离，这时须选择可以用纯水作流动相而不会产生相塌陷的耐水相色谱柱。引自《中国药品检验规范》。 |
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